目的:隐睾是小儿泌尿生殖系统常见的先天性发育畸形,儿童期隐睾是成人后男性非梗阻性无精子症最常见的病因,尤以双侧隐睾多见且发病率呈逐年递增趋势,临床上,隐睾的手术治疗已趋于成熟,睾丸下降固定术可以解剖复位重建,将隐睾下降并固定于阴囊的正常位置,降低睾丸癌风险,但是难以改善隐睾早期功能损害,无法改善成人后生育能力。隐睾术后萎缩以及远期隐睾相关男性不育的研究机制尚不完全清楚,缺乏有效治疗手段。隐睾激素辅助治疗被认为是一种安全有效的治疗方式,通过激素辅助治疗可以有效纠正隐睾男童的微小青春期缺陷,保护生育潜力。本研究以雄激素对睾丸、精子的影响为切入点,探索外源性丙酸睾酮对双侧隐睾大鼠睾丸生精功能的影响。方法:将30只3周龄SD雄性大鼠随机分为五组,假手术组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组6只SD雄性大鼠。通过手术建立双侧隐睾大鼠模型,假手术组SD大鼠暴露过程与模型组相同,睾丸不予任何处理。术后丙酸睾酮干预组SD大鼠从第二天开始丙酸睾酮辅助治疗,模型组注射等量1ml芝麻油,低剂量组、中剂量组、高剂量组大鼠分别注射1ml丙酸睾酮2、4、8mg/kg,隔日臀部肌肉注射。3周后收集各组睾丸,称取重量,计算睾丸体重比;取血离心后收集各组血清,使用Elisa试剂盒测量各组LH、FSH以及T激素水平;采集各组附睾及输精管内精液,对其进行计数并观察其形态学变化,记录精子生成情况。留取各组睾丸组织,4%多聚甲醛固定后切片,HE染色观察其组织学改变及睾丸紧密连接结构、TUNEL法检测精原细胞凋亡,免疫组织化学法、免疫荧光学法、Western Blot蛋白印迹法检测凋亡关键因子Bcl-2/Bax及睾丸紧密连接蛋白Claudin 11的表达水平。结果:模型组睾丸重量、睾丸/体重脏器系数较假手术组明显降低,且差异有统计学意义;低剂量、高剂量组睾丸重量及睾丸/体重脏器系数较模型组均有增加,但差异无统计学意义;中剂量睾丸重量、睾丸/体重脏器系数较模型组明显增加,且差异有统计学意义。模型组大鼠血清FSH、LH明显升高,T激素明显下降,差异有统计学意义。低、中、高剂量组FSH激素水平逐渐下降,LH激素水平逐渐升高,T激素水平呈现先升高后下降趋势。模型组精子计数、精子存活率明显低于假手术组,精子畸形率明显高于假手术组,且差异有统计学意义;低、中、高剂量组与假手术组比较,给药后精子计数、精子存活率明显升高,精子畸形率也明显降低,其中低剂量组、中剂量组精子计数、精子存活率及畸形率与模型组相比,差异均有统计学意义,以中剂量组效果最佳。假手术组可见各层生殖细胞排列整齐,曲细精管管腔中可见大量精子细胞及絮状精子;模型组睾丸各级生殖细胞排列紊乱、数目减少且发育迟缓,曲细精管管腔明显缩窄,管腔间隙变大,管腔中央无絮状精子形成;丙酸睾酮干预组睾丸结构与模型组相比均有部分恢复,中剂量组结构改善最为显著。TUNEL法检测结果显示,模型组生殖细胞凋亡明显高于假手术组,与模型组相比低、中、高剂量组有不同程度改善,中剂量组生精细胞凋亡数较少;蛋白免疫印迹显示,与假手术组相比,模型组精原细胞凋亡因子Bax表达明显上调,抗凋亡因子Bcl-2下调,而中剂量组较模型组Bax表达水平明显下调,Bcl-2表达水平明显上调,接近于假手术组。模型组支持细胞间的紧密连接结构遭到破坏而出现裂隙,紧密连接蛋白Claudin 11表达水平降低;中剂量组紧密连接结构得到改善,Claudin 11表达水平明显升高。结论:给予中剂量4mg/kg的丙酸睾酮可以在双侧隐睾大鼠模型中通过调控Bax及Bcl-2表达发挥抗凋亡作用;同时可以上调紧密连接蛋白Clandin-11修复隐睾所致的血睾屏障损伤,改善生精微环境,对双侧隐睾大鼠睾丸和精子产生修复作用。高剂量丙酸睾酮将负反馈抑制下丘脑-垂体-性腺轴,使得内源性睾酮水平下降,保护作用消失,甚至产生抑制作用。