目的：美罗华即利妥昔单抗(rituximab)的治疗是针对CD20抗原产生作用,并有效地耗竭表达CD20的B细胞前体和成熟的B细胞。当这些B细胞被清除后,B细胞可以再生。应用美罗华治疗难治性重症肌无力MG (myasthenia gravis,MG)方法可以为我们在MG患者中观察B10细胞亚群提供了一个机会,我们研究MG患者的临床严重程度和状态用美国重症肌无力协会制定的标准即MGFA (Myasthenia Gravis Association of American Scores, MGFA)进行评定,确定患者血液单核淋巴细胞中分泌IL-10的B细胞出现的频率,并进一步研究B10细胞在MG患者的动力学变化,同时与健康对照者相比较。确定重症肌无力患者分泌IL-10的B细胞即是B10细胞亚群的特征,发现B10细胞在重症肌无力患者体内变化的特点,它与疾病严重程度的相关性,并且确定这种细胞在患者接受美罗华治疗前后的变化特点,进一步与健康对照者进行比较。从而确定这类B10细胞在MG患者中的特征表现,并评价其与疾病活跃程度及美罗华治疗前后的B10细胞的消耗程度,为的是寻找一个在MG患者中与疾病活跃程度和对免疫治疗反应的标记。研究B细胞特别是B10细胞在自主免疫疾病特别是重症肌无力的诊断、疾病状态的观察与免疫治疗效果等方面的变化特点,从而为MG的诊断、治疗、疾病控制程度等领域的理论和实践开辟了新的途径。方法：48例符合研究条件的MG患者被纳入研究,外周血的单核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cells, PBMCS)从MG患者及健康对照组患者外周血中分离出来,其中有22例MG患者对传统的治疗效果反应差而成为难治性MG患者,对这22例难治性的MG患者给予正规的持续1.5年的美罗华治疗。确定为难治性重症肌无力的标准是指患者继往至少使用两种免疫抑制剂,并且其中一种是糖皮质激素,或至少在继往使用的免疫抑制剂中有一种是强的松,但是治疗效果不满意。每个患者接受四次美罗华的静脉注射治疗,每周一次,每次剂量是375mg/m2。分别在试验开始时、3-4个月、8-9个月和15-16个月四个点抽取患者外周血同时获取健康对照组的外周血,并用流式细胞技术(FACS)将表面带有CD19,CD1d, CD5, CD24, CD38的抗原和分泌IL-10的B细胞亚群分选出来,监测不同临床亚型MG患者和接受美罗华治疗的MG患者体内这些B细胞的表达水平和变化特点。并且与健康对照组进行比较。结果：与健康人群对比发现CD19+的分泌IL-10的B细胞数量在MG患者中减低,这种分泌IL-10的B细胞多数共同表达CD5和CD1d或CD24和CD38,而在重症肌无力患者中按MGFA评价后得分高的患者产IL-10的B细胞的数量减低。与健康对照组相比,MG患者体内的B10细胞多数表达CD5和CD1d或是CD24和CD38。MG患者血中B10细胞的含量越低；患者的MGFA分数越高,B10细胞亚群在重症肌无力患者血液中的水平减低越明显。进一步显示对美罗华反应良好的重症肌无力患者显示出快速B细胞特别是B10细胞的再生能力,而对美罗华治疗反应不良的重症肌无力患者,其B10细胞的再生速度延迟。我们观察到MG患者对美罗华治疗反应良好者显示B细胞能够针对治疗快速反应分泌IL-10而对反应不佳者,B细胞反应延迟。结论：重症肌无力患者血液单核细胞中的B10细胞与疾病的进程和阶段发展有相关性,并且B10细胞的动力学变化与美罗华治疗重症肌无力的反应相关。我们认为能够分泌IL-10的CD5+CDld+CD24+CD38+B的B细胞亚群可以作为MG患者疾病活跃程度和针对免疫治疗反应的一个标志。我们的研究证实B细胞中一个特殊亚群CD5+CDld+CD24+CD38+B细胞合成分泌IL-10,可以作为重症肌无力患者的对免疫治疗反应的一个指标,也可以作为疾病活跃程度的一个指标,我们的工作为研究B细胞的自主免疫疾病领域的理论和实践开辟了新的途径。