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女性生殖周期雌孕激素呈现周期性变化,尤其是妊娠过程和分娩后激素的较大变化使得女性出现各种各样情绪障碍及各种临床症状。有研究认为,妇女的以上各类精神疾病均有女性生殖周期雌、孕激素等卵巢甾体激素的波动所引发。这些临床症状的出现与孕激素对GABAA调节系统的作用有关。但体内神经甾体激素及其中枢神经系统的调控变化与此类抑郁症相关性的认识尚未统一,现有的研究尚不足以揭示此类疾病发生的实质。对激素与相关情绪变化相关关系的研究,将对揭示激素与情绪变化的机理提供新的科学依据。本实验以此为出发点,研究啮齿类动物鼠在不同生殖周期各项指标的变化,分析各组它们血清孕激素含量与不同脑区突触外GABAA受体δ亚基的表达的相关性。第一部分:雌性小鼠不同生殖周期大脑皮层和海马突触外GABAA受体的表达研究目的探究雌性小鼠不同动情周期动物行为学的变化,不同生殖周期皮层及海马突触外GABAA受体的表达的变化。方法以6周龄有完整动情周期雌性C57BL/6J小鼠实验对象,采用阴道涂片法,每天分8:00、16:00和22:00三个时间段进行动情周期的鉴别,以精确判断小鼠动情周期,筛选出具有完整生殖周期的小鼠,确定其每个周期的持续时间。并将其分为两组,即动情期组与动情间期组;Elisa检测每组小鼠血清雌孕激素含量;高架十字迷宫实验观察每组小鼠的行为学变化;免疫组织化学法观察每组小鼠海马突触外GABAA受体δ亚基的表达;分析各组小鼠血清孕激素含量与突触外GABAA受体δ亚基的表达的相关性。结果Elisa结果显示,动情间期组雌鼠血清孕酮含量(12.47±1.89ng/mL)高于动情期组(6.02±2.20ng/mL),而雌激素水平动情间期(157.00±21.30pg/mL)低于动情期组(185.48±35.42pg/mL);本研究室使用的小鼠高架十字迷宫实验显示,动情期组与动情间期组小鼠在高架十字迷宫开臂、闭臂以及中央平台的活动总的活动时间无明显差异,但是在开臂中小鼠活动的次数和时间,动情间期组高于动情期组,差异具有统计学意义(P<0.05);免疫组化结果显示,海马脑区GABAA受体δ亚基的阳性表达动情间期组(28.93×10-3±4.92×10-3)高于动情期组(18.89×10-3±3.74×10-3)较强,差异具有统计学意义(P<0.05),大脑皮层GABAA受体δ亚基阳性表达较强,但动情间期组(39.84×10-3±2.97×10-3)与动情期组(37.31×10-3±1.13×10-3)无明显差异(P>0.05)。动情间期与动情期海马δ亚基阳性结果IOD值与体内孕酮浓度的变化呈显著性相关,相关系数为r=0.9924。结论1.C57BL/6J小鼠平均动情周期为5.3天,小鼠血液雌激素浓度动情期组高于动情间期组,血液孕酮浓度动情间期组高于动情期组,雌、孕酮在小鼠体内随卵巢变化呈周期性的变化。2.在小鼠生理状况下,不同生殖周期雌孕激素水平会发生波动,进而影响GABAA受体δ亚基在不同生殖周期特定脑区的表达。海马脑区突触外GABAA受体δ亚基的表达在动情期低,而动情间期高,且突触外δ亚基的表达随孕酮浓度的增高而加强,两者呈线性相关。3.大脑皮层突触外GABAA受体δ亚基的表达在动情间期与动情期无明显差异。4.行为学实验显示:动情间期小鼠在高架十字迷宫上进入开臂的时间和次数大于动情期小鼠,动情间期小鼠对环境变化的适应性增高。第二部分:大鼠大脑海马齿状回、杏仁核突触外GABAA受体表达与生殖周期雌孕激素变化相关性研究目的明确生殖周期中卵巢甾体激素波动是否引发特定脑区神经元突触外GABAA受体表达变化及相关性。方法阴道涂片法筛选出具有完整生殖周期的大鼠,并将其分为两组,动情期组与动情间期组;Elisa检测每组大鼠血清雌孕激素含量;免疫组化法观察每组大鼠海马齿状回、杏仁核突触外GABAA受体δ亚基的表达;分析各组大鼠血清孕激素含量与突触外GABAA受体δ亚基的表达的相关性。结果血清雌激素含量动情期组(42.51±2.42)高于动情间期组(23.17±1.45),而孕酮含量动情期组(7.41±2.86)则低于动情间期组(10.31±1.74),组间差异具有统计学意义(P<0.05)。免疫组化结果显示,海马齿状回GABAA受体δ亚基的阳性表达动情间期组(105.47±4.73)高于动情期组(79.23±2.89),差异具有统计学意义(P<0.05),杏仁核GABAA受体δ亚基的阳性表达动情间期(93.51±3.54)组高于动情期组(58.92±1.47),差异具有统计学意义(P<0.05);海马齿状回、杏仁核突触外δ亚基阳性结果IOD值随着动情间期与动情期孕酮浓度值的增加而增加,两变量呈线性相关,相关系数分别为R=0.9866、R1=0.9876。结论动情间期高水平的孕激素可致大脑海马齿状回、杏仁核突触外GABAA受体高表达。