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目的木瓜是一味应用历史悠久的中药,具有抗炎、抗氧化、抗菌、镇痛、保肝、抗肿瘤等作用。《中国药典》(2010版,一部)规定,药用木瓜为蔷薇科植物贴梗海棠Chaenomeles speciosa(Sweet) Nakai的干燥近成熟果实,习称“皱皮木瓜”,是一种药食两用的传统中药。山东临沂为山东皱皮木瓜的主产区,种植面积大。目前山东木瓜除了作为传统中药,果实还被加工成蜜饯、罐头、果醋、果汁、果脯、果酒、等保健产品以及化妆品等美容产品。皱皮木瓜籽不是传统的食用或者药用部位,除了少数用作育种外,大部分被当作食用后的残渣或者生产加工后的副产物弃去,没有引起人们的重视,造成了资源的浪费,对山东产皱皮木瓜籽的药用价值研究也未见报道。为了能综合、全而地开发利用山东产皱皮木瓜药材资源,推进皱皮木瓜的现代化发展,本课题采用有效化学物质组学的思路,综合利用多种提取方法,提取木瓜籽中不同极性的化学成分,采用GC-MS、HPLC-MS技术,对部分化学成分进行了定性、定量分析,并结合清除DPPH、ABTS自由基活性实验考查其抗氧化活性,以期发现其药理活性成分,为山东产皱皮木瓜籽的药用价值研究提供科学的方法和实验依据,促进山东产皱皮木瓜的综合利用。方法和结果(1)以山东临沂产皱皮术瓜籽为研究对象,采用索氏提取法,进行正交实验,以提取得到总油脂的量(g)为指标,确定最佳提取方案,并考察山东产皱皮木瓜籽出油率。结果显示质量较好、种仁饱满的山东产皱皮术瓜籽出油率较高(约为20%),可以作为一种新型脂肪酸来源进行开发研究。(2)采用(GC-MS技术,对山东产皱皮木瓜籽油的主要脂肪酸成分进行定性、定量分析,确定了11个共有峰对应的成分。定量结果显示,木瓜籽中不饱和脂肪酸含量较高,占脂肪酸总量的87%以上,其中单饱和脂肪酸主要是9Z-十八碳烯酸(油酸,约为54%),多不饱和脂肪酸主要是9Z,12Z-十八碳二烯酸(亚油酸,约为32%)。提示山东产皱皮木瓜籽油可能具有抗炎振痛、消除自由基、抗动脉粥样硬化等药理活性,具有潜在的药用价值,为木瓜籽油的药理活性研究、开发提供了理论和实验依据。(3)采用超声提取法,结合清除DPPH自由活性实验和HPLC色谱图,考察木瓜籽抗氧化活性部分的最佳提取条件。采用溶剂萃取的方法,将抗氧化活性部分分为不同极性的化学物质组,分别测定总多酚含量及抗氧化活性。结果显示木瓜籽乙醇提取物具有较强的抗氧化活性,且多酚含量较高,为木瓜籽的利用提供了科学的提取方法和实验数据。(4)联合采用硅胶柱色谱法、TLC法对活性部分进行了分离,并用HPLC MS法对分离良好的部分进行定性分析。确定了五个色谱峰可能对应的成分,其中四个鉴定为四种长链饱和脂肪酸;另一个化合物,根据其质谱精确分子量信息所确定的分子式,初步推断与强抗氧剂2,2’-亚甲基双(4甲基-6-叔丁基酚)(简称2246)的分子式吻合,但是结构是否一致还有待进一步确认,提示木瓜籽乙酸乙脂萃取物的抗氧化活性可能与该化合物的存在有关。结论及意义本课题选取产量较大却未见研究报道的山东产皱皮木瓜籽为研究对向,采用有效化学物质组学的思路,对木瓜籽油中脂溶性成分进行了定性、定量分析;对木瓜籽中醇溶性的化学物质组进行抗氧化活性实验,为山东产皱皮木瓜籽的开发研究提供了科学的方法和实验验依据,对促进山东产皱皮木瓜的综合利用和现代化研究具有重要的意义和价值。