论文部分内容阅读
目的：观察预防性电针干预治疗对快速老化模型小鼠(SAMP8)行为学、脑Aβ沉积以及细胞凋亡的影响,探讨电针对阿尔茨海默病的预防性干预作用。方法：选取5月龄快速老化模型小鼠(SAMP8)30只,随机分为模型组、束缚组和电针组,每组10只；抗快速老化模型小鼠(SAMR1)10只作为正常对照组。电针组给予预防性电针治疗,选取百会及印堂穴并加电针刺激,施以疏密波(频率2／100Hz),电流强度为0.2-0.4mA,每次留针20min,隔日1次,一周3次,12次为1疗程,连续治疗3个疗程；束缚组给予和电针组小鼠同等强度和时间的束缚。分别在电针干预前及每个疗程后应用Morris水迷宫观测各组小鼠行为学的变化,分析预防性电针干预对SAMP8小鼠学习记忆能力的影响。行为学检测结束后,各组小鼠麻醉后行多聚甲醛经腹主动脉灌注,取含有海马和顶叶皮层的脑组织,制作切片。采用免疫组化染色法检测海马及顶叶神经细胞内A β的表达情况,统计各组神经细胞Aβ表达的阳性细胞数；采用Tunne1染色法观察海马区神经细胞凋亡情况,并统计各组神经细胞凋亡阳性细胞率及光密度值。结果：1行为学测试结果预防性电针干预治疗3个疗程后,与对照组(SAMR1)比较,模型组小鼠在Morris水迷宫实验中表现出明显的学习记忆障碍,具体表现为：定位航行实验中逃避潜伏期明显延长(P<0.05),空间探索实验中原平台象限停留时间显著缩短(P<0.05)。电针组的逃避潜伏期与模型组和束缚组比较,显著缩短(P<0.05),与对照组比较无明显差异(P>0.05)；电针组的原平台象限停留时间与模型组和束缚组比较,显著延长(P<0.05),与对照组比较无明显差异(P>0.05)。2病理学检测结果免疫组化染色观察海马及顶叶皮层Aβ蛋白的表达,模型组阳性细胞数明显增多,多数为中度阳性,部分为强阳性表达。对照组偶见阳性细胞,散在分布,且几乎全部为弱阳性和中度阳性,未见强阳性细胞。束缚组阳性细胞介于正常和模型组之间,偶见强阳性细胞。电针组阳性细胞数量比束缚组少。Tunne1染色下,对照组的神经细胞凋亡阳性率最低,模型组最高,二者比较有显著差异(P<0.05)。电针组的神经细胞凋亡阳性率大于对照组,但均小于模型组和束缚组。模型组的凋亡细胞光密度值最大,其次为束缚组,二者均显著高于对照组。电针组凋亡细胞光密度值明显低于模型组,两者比较有显著差异(P<0.05)。结论：1行为学实验结果表明SAMP8小鼠在8月龄出现学习记忆功能障碍,进入明显的快速老化期。经预防性电针干预治疗后SAMP8小鼠在8月龄未出现明显的学习记忆功能受损表现,提示预防性电针干预可以改善SAMP8小鼠的学习、记忆功能。2病理学检测结果显示8月龄SAMP8小鼠海马及顶叶皮层神经元内出现Aβ沉积,海马区神经元细胞出现细胞凋亡。经预防性电针干预后,可见SAMP8小鼠海马及顶叶神经元内Aβ沉积减少,海马区神经细胞凋亡减轻。我们可以得出预防性电针干预对SAMP8小鼠的老化进程具有一定的延缓作用。