南北五味子多糖的比较研究

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南五味子为木兰科植物华中五味子Schisandra sphenanthera Rehd.et Wils.的干燥成熟果实,南五味子属植物主要分布于西南和南部地区,包括云南、福建、四川、贵州、广东、广西等省。北五味子为木兰科植物五味子Schisandra chinensis (Turcz.) Bail1.的干燥成熟果实,五味子属植物主产于东北三省及内蒙古等地区。因为两种五味子产地的不同,它们的化学成分会有很大不同。虽然《中国药典》2005年版对南、北五味子分别单独制定了质量标准,中药成方制剂处方也都明确指定五味子的品种,但是临床应用中经常将两种五味子混淆使用,这使南、北五味子的化学成分的比较研究十分必要。而多糖作为南、北五味子中主要的有效成分之一,是比较研究中的重要部分。所以本论文旨在比较研究南、北五味子多糖的化学成分组成和生物活性,探讨两类多糖的构效关系及活性差异,从而指导南、北五味子两种中药材的临床使用。本课题首先采用柱层析分离法从南、北五味子中提取得到南、北五味子多糖样品NPS1-1和BPS1-1,对这两种均一多糖进行了主要成分含量、单糖组成、特性黏度、红外光谱(FTIR)、圆二色谱(CD)、扫描电镜(SEM)、静态激光光散射(MALLS)和原子力显微镜(AFM)等分析。结果显示:NPS1-1和BPS1-1的单糖组成以半乳糖和葡萄糖为主;NPS1-1和BPS1-1都具有多糖的特征吸收峰,并且其主要官能团基本一致;NPS1-1的形态主要是粒状,而BPS1-1的形态主要是条状;NPS1-1的特性黏度要大于BPS1-1; NPS1-1的构象要比BPS1-1稳定一些;NPS1-1的重均分子量Mw(2.22×106)要小于BPS1-1的重均分子量(2.65×106),NPS1-1的回转半径Ag(83nm)小于BPS1-1的回转半径(97nm), NPS1-1的第二维利系数A2(-3.9×10-4cm3mol/g2)大于BPS1-1的第二维利系数A2(-8×10-4cm3mol/g2);NPS1-1的立体形态呈现块状,高度是0.556nm-1.874nm,半径是658nm,而BPS1-1呈现出长条状,高度是0.420nm-1.407nm,半径是731nm。、然后采用乙醇分级法得到NPS-60和BPS-60,然后对样品NPS-60、BPS-60、NPS和BPS进行了构象和抗氧化活性的比较研究。结果显示:NPS-60的分子量要大于BPS-60的分子量,NPS-60的颗粒粒径要大于BPS-60的, NPS、BPS和BPS-60的构象是无规则线团,而NPS-60的Mark-Houwink指数数值不在文献所列的范围内,无法得知其构象。抗氧化活性实验的结果显示NPS-60的活性高于NPS、BPS和BPS-60;南北五味子多糖对比结果是NPS和NPS-60的抗氧化活性高于BPS和BPS-60。最后对NPS-60和BPS-60进行了硫酸化、乙酰化和羧甲基化修饰,对其进行了主要组分、紫外光谱、红外光谱(FTIR)、扫描电镜分析和抗氧化活性研究。结果显示,硫酸化和羧甲基化的取代度比较高,NPS-60硫酸化衍生物的取代度高于BPS-60硫酸化衍生物的取代度,而羧甲基化的取代度BPS-60高;衍生物的总糖的含量要低于,经过衍生化后,各衍生物的表观形态发生了很大变化,NPS-60和BPS-60发生的变化不同;在肝脂质过氧化抑制作用和清除OH自由基作用中,硫酸化衍生物活性高于未处理样品,乙酰化和羧甲基化处理后,样品活性有所下降,衍生化对BPS-60的活性的影响要大于NPS-60。南、北五味子多糖样品NPS1-1、BPS1-1及NPS-60、BPS-60从分子量、分子形态、构象以及活性等方面都存在不同,所以南、北五味子中药材在临床应用中要加以区分。
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