金银花中绿原酸的提取分离及抗氧化作用研究

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金银花为忍冬科忍冬属植物忍冬的干燥花蕾,是一种具有多种生物活性的传统中医用药。其主要功能成分绿原酸具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤、保肝利胆、降血压血脂、清除自由基和兴奋中枢神经系统等作用,是许多中药材的有效成分之一,又是某些成药的质量指标。绿原酸可应用的范围非常广,主要为医药、日用化工和食品等行业。本文主要研究了金银花中绿原酸的检测方法、提取纯化方法和抗氧化作用,以期为提高绿原酸的提取纯度和研究开发功能作用提供参考。本论文以河南封丘产金丰一号金银花为材料,对比研究了分光光度计法、高效液相色谱法、薄层层析色谱法三种常见的绿原酸检测方法。结论:高效液相色谱法因其高精确度、准确性和分光光度法多用于定量分析,而薄层色谱法更适于快速定性鉴别分析。本试验对近年来金银花中绿原酸常见提取工艺:水提法、醇提法、超声波提取法、沉淀法等进行了对比研究,以高效液相色谱法为检测手段,得出改进提取方法—改良乙酸乙酯法,测定提取率为37.7%,得率为44.3%。采用高速逆流色谱法,选择出绿原酸分离纯化的两相溶剂系统:乙酸乙酯:乙酸:水(4:1:5,V/V),优化分离参数:流速1ml/min,仪器转速800rpm,温度45℃,实现从金银花提取物中一次分离出绿原酸。该方法操作简单、分离效率高,可作为高纯度绿原酸化学对照品的制备分离方法。本试验主要采用铁离子还原法、羟自由基和二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)体系对金银花提取物进行抗氧化活性的研究,并以绿原酸和抗坏血酸作为对照。结论:金银花提取物清除羟自由基和DPPH·自由基的能力较强;而绿原酸的还原能力最强;从三个试验中可以得出,绿原酸是起抗氧化作用的主要物质。
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