[目 的]周围神经损伤是导致肢体残障的重要原因之一,全球每年至少有200万人存在周围神经损伤,造成严重的经济和生活负担。在缺损节段无法通过显微外科技术完成时,神经移植成为治疗周围神经损伤的方法之一。自体神经移植作为金标准存在一定的局限,因此寻找合适的周围神经缺损修复材料成为研究热点。基于组织工程的理念,种子细胞在神经损伤修复过程中同样扮演重要角色。本研究以坐骨神经细胞外基质(extracellular matrix,ECM)为神经导管,脂肪组织血管基质组分(stromal vascular fraction,SVF)和脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)为种子细胞在体内和体外评价其对神经细胞和大鼠坐骨神经损伤修复的作用,并对其有效性进行评价。[方 法]取SD大鼠坐骨神经,通过十二烷基磺酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)进行化学去细胞,并对其保留的细胞外基质成分进行物理、化学评价;在体外,通过培养获得ADSCs和分离所得SVF,并通过流式细胞学分析和多向分化对ADSCs进行评价,同时分别将SVF、ADSCs与背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)共培养,对比观察体外促进轴突生长的效果。在体内,建立大鼠坐骨神经15mm缺损模型,并将SVF和ADSCs分别复合坐骨神经ECM移植物修复大鼠坐骨神经缺损。术后6周对移植物中远段取材并进行免疫荧光染色,观察髓鞘再生情况;术后12周,通过步态分析、坐骨神经功能指数(sciatic functional index,SFI)、腓肠肌肌肉湿重率分析、甲苯胺蓝染色、透射电镜扫描以及Masson染色等方法对比评价桥接材料对大鼠坐骨神经缺损修复效果。[结 果]去细胞坐骨神经移植物具有3D网格状结构,同时保留了大量的胶原成分、层粘连蛋白和纤维连接蛋白成分。ADSCs细胞在体外可诱导分化为脂肪细胞、骨细胞和软骨细胞;同时,SVF和ADSCs在体外可促进轴突生长。坐骨神经ECM移植物复合SVF和ADSCs通过步态分析、坐骨神经功能指数、腓肠肌肌肉湿重率分析、甲苯胺蓝染色、透射电镜扫描以及Masson染色等方法评价结果均优于单纯去细胞神经移植组(对照组),差异具有统计学意义。[结 论]本实验通过制备坐骨神经ECM移植物并复合SVF和ADSCs在体外评价中可有效促进周围神经细胞生长,体内评价可有效促进大鼠周围神经缺损修复,其治疗效果接近自体神经移植。