巴西苏木素是中药苏木心材提取的主要活性成分之一。近年来,有关巴西苏木素药理活性研究表明:巴西苏木素具有抗肿瘤、降血糖、血管舒张等活性。然而,口服、静脉注射巴西苏木素却疗效甚微,并且其水溶液暴露在空气中,极易从无色变黄再变红,颜色逐步加深。但是,至今为止,巴西苏木素失活成因及变色行为的相关研究仍未见报道。本工作以苏木饮片为原料,在探究巴西苏木素变色(失活)行为的过程中,首先经层析分离、结构鉴定,确定了巴西苏木素变色产物的结构及其结构转化行为;建立了一种新的简便、快速测定巴西苏木素含量的方法;同时对从苏木中提取巴西苏木素的工艺进行了优化。其内容及结论如下:1.巴西苏木素变色(失活)行为的研究苏木提取物经薄层色谱分离,并跟踪其自然色变过程及其观察各种加速色变试验行为,然后提取变色产物经红外光谱测定其结构。结果表明:巴西苏木素变色(失活)行为主要是其自身化学结构赋予了它极易氧化的特性所致,其色变成因可用下式表达。其结果为巴西苏木素提取工艺优化及其药理学方面的研究提供了理论依据。2.薄层色谱测定巴西苏木素含量方法的建立通过对苏木提取物的薄层色谱分离、显色、稳定性提高及其方法学的研究,建立了外标一点法测定巴西苏木素含量的新方法。其结果表明:在GF254硅胶板上,以氯仿:丙酮:甲酸比为8:4:1的混合溶液为展开剂,上行法展开后,氨熏碱化,再喷以Al Cl3溶液后,利用薄层色谱扫描仪,在测定波长为508 nm处,外标一点法测定巴西苏木素含量。其巴西苏木素含量在0-6μg范围内与其吸光度呈良好的线性关系(R2=0.9962),精密度RSD≤3.40%,回收率平均值为101.75%。该法可用于巴西苏木素含量的简便、快速、准确测定。为巴西苏木素提取工艺优化、产品质量控制及其药学药理等方面的研究提供了一种有效的实验手段。3.巴西苏木素提取工艺优化以干粉得率和巴西苏木素含量为考查指标,对苏木提取巴西苏木素的溶剂、提取次数、脱脂剂比例等条件分别进行了单因素和响应面分析,优化了巴西苏木素的提取工艺。其具体操作步骤为:以苏木饮片为原料,用体积分数为56%的酒精溶液,料液比为1:8,浸泡1 h,加热回流提取1.8 h,分别提取4次,合并提取液,在负压下旋蒸直至浓缩至1 g/0.5 m L,在0-4℃下静置48h,过滤得滤液,用滤液2倍量的石油醚:乙酸乙酯=3:1的溶剂对滤液脱脂,以450r/min的转速搅拌15min,静置20 min分离得水相,再用水相2倍量乙酸乙酯萃取除杂,以450 r/min的转速搅拌15 min,静置60 min,得有机相,并用无水硫酸钠充分干燥,负压下(温度≤40℃,真空度≈0.08MPa)旋蒸得粗提物,再向粗提物中加入4倍量的蒸馏水溶解、过滤,加入滤液4倍量的乙酸乙酯:石油醚=2:1的萃取剂,萃取2次,以450 r/min的转速搅拌15 min,静置分层的有机相,有机相加入无水硫酸钠干燥后转入旋转蒸发仪,负压(温度≤40℃,真空度≈0.08MPa)旋蒸得干粉精制品,从苏木中提取精制的干粉得率和干粉中巴西苏木素含量分别为1.9%和52.1%。本工艺中有机相均可以回收循环利用,此工艺操作简单,成本低廉,适于工业化生产。