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随着经济的快速发展,人们的收入也越来越高,对饮食的安全意识也越来越高。本论文以抗营养因子、中药潜在有害物质和重金属为研究对象,制备了针对大豆胰蛋酶抑制因子、噁唑烷硫酮、秋水仙碱、乌头碱、松香酸、马兜铃酸、铅离子和汞离子的单克隆抗体,并基于这些抗体建立了相应的免疫学快速检测方法。1、抗营养因子单克隆抗体制备及免疫学检测方法的建立（1）通过免疫小鼠,细胞融合,得到了可同时识别BBI和KTI的配对抗体3E9和2F12,在双抗夹心ELISA最佳条件下,该组抗体对BBI和KTI的检测限分别为0.7 ng/mL和2.2 ng/mL,基于该组抗体,分别建立了检测KTI和BBI的胶体金免疫层析试纸条,其对BBI的检测限为10 ng/mL,对KTI的检测限为50 ng/mL,并对豆浆样本进行了检测。（2）设计了噁唑烷硫酮的半抗原,制备了噁唑烷硫酮的单克隆抗体3B4,其亚型为IgG1,亲和力常数为3.78×109L/mol。优化ic-ELISA得到抗体3B4的IC50为541.72ng/mL,检测区间为95.33～3078.24 ng/mL,且与其结构类似物无交叉。建立并优化了用于检测噁唑烷硫酮胶体金免疫层析试纸条,在PBS中的可视化检测区间为6～14μg/mL,在油菜籽样本中的可视化检测区间是40～100μg/mL。（3）选择秋水仙碱的类似物作为半抗原,并合成包被抗原和免疫原,制备了抗体1E4,其亚型为IgM,优化ic-ELISA得到1E4的IC50和检测区间分别为0.43 ng/mL和0.09～2.16 ng/mL。建立了检测秋水仙碱的胶体金免疫层析定量检测试纸条,在PBS中的可视化检测区间为0.5～10 ng/mL,回收率为95.3～99.54%;在牛奶中的可视化检测区间为1～25 ng/mL,回收率为93.56～97.4%;在牛肉中的可视化检测区间为2.5～50 ng/mL,回收率为84.96～95.8%;在食用百合中的可视化检测区间为1～25 ng/mL,回收率区间为93.97～102.33%;在黄花菜中的可视化检测区间为2.5～25 ng/mL,回收率区间为83.51～106.52%。2、中药潜在危害物质单克隆抗体制备及免疫学检测方法的建立（1）设计了乌头碱的半抗原,制备了单克隆抗体5D1,其亚型为IgG1,亲和力常数为1.25×101 0L/mol。优化ic-ELISA得到抗体5D1的IC50是3.45 ng/mL,检测区间是1～11.91 ng/mL,且与其结构类似物无交叉,在川木通和附子理中丸中的回收率区间分别为91.2～106.88%和93.02～103.08%。建立并优化了检测乌头碱的胶体金免疫层析试纸条的条件:在PBS中的可视化检测区间为5～10 ng/mL;在川木通样本中的可视化检测区间是10～25 ng/mL;在附子理中丸样本中的可视化检测区间是100～250 ng/mL。（2）将蛋白巯基化后再与松香酸的双键偶联,合成包被抗原和免疫原并制备了抗体3H8,其亚型为IgM,亲和力常数为7.93×108L/mol。优化ic-ELISA得到的抗体3H8的IC50是15.17 ng/mL,检测区间为4.23～54.43 ng/mL,且与其结构类似物无交叉,在跌打片中回收率均91.67～101.83%,;在在风湿关节炎片中回收率为92.48～101.14%。建立并优化了检测松香酸的胶体金免疫层析试纸条,在PBS中的可视化检测区间是50～500ng/mL,在跌打片和风湿关节炎片中可视化的检测区间均为100～1000 ng/mL。（3）通过合成马兜铃酸的包被原和免疫原,制备了抗体2A8,其亚型为IgG1,亲和力常数为1.96×108L/mol,优化ic-ELISA得到2A8的IC50为4.21 ng/mL,检测区间为0.62～28.66 ng/mL,且与其结构类似物无交叉,在川木通中的回收率为95.48～101.89%。建立并优化了胶体金免疫层析试纸条,在PBS中的可视化的检测区间是10～100 ng/mL,在川木通样本中的可视化检测区间是250～500 ng/mL。3、重金属单克隆抗体制备及免疫学检测方法的建立（1）通过双功能螯合剂ITCBE合成铅离子的包被抗原和免疫原,最终制备得到抗体2C3,其亚型为IgG2a,亲和力常数为2.38×1010 L/mol。优化ic-ELISA得到的IC50为0.51 ng/mL,检测区间为0.15～1.75 ng/mL,且与其它金属离子无交叉,在糙米中的回收率为91.16～104.27%。建立并优化荧光免疫层析定量检测试纸条,在HBS中可视化的检测区间为5～25 ng/mL;在糙米中的可视化的检测区间是10～50 ng/mL,回收率为93.25～111.24%。（2）通过双功能螯合剂ITCBE合成汞离子的包被抗原和免疫原,最终制备了抗体2C10,其亚型为IgG1,亲和力常数为5.67×109 L/mol。优化ic-ELISA得到的得到的IC50为2.69 ng/mL,检测区间为0.44～16.25 ng/mL,且与其它金属离子无交叉,在牛奶样本的回收率为94.06～101.58%。建立并优化了胶体金免疫层析检测试纸条,在HBS中的可视化检测区间是10～50 ng/mL,在牛奶样本中的可视化检测区间是20～100 ng/mL。