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目的 研究预电刺激小脑顶核对大鼠脑缺血/再灌注后DNA氧化性损伤的作用,以了解电刺激小脑顶核对实验性脑缺血及再灌注神经保护的分子机制。 方法 健康雄性Wistar大鼠106只,体重250±30g,随机分为4组:(1)单纯造模组;(2)预刺激组;(3)毁损小脑顶核组;(4)假手术组。(3)组大鼠用鹅膏氨酸毁损两侧小脑顶核,(2)、(3)组大鼠均以电刺激器刺激左侧小脑顶核,(1)-(3)组大鼠用线栓法成功制作可复流的MCAO模型,2小时后再灌注。在再灌注后6小时、24小时、48小时将大鼠断头取脑,保存于液氮。均匀切成2mm厚的脑片,取第三片提取DNA或RNA,余作冰冻切片。DNA样品经酶解后上高效液相-电化学检测器检测8-ohdG。RNA样品通过RT-PCR的方法探测rOOG1mRNA的表达。通过原位杂交的方法及末端标记法检测Ku70mRNA的表达及Tunel阳性细胞数。结果 (1)大鼠脑缺血/再灌注后缺血区8-ohdG堆积。预刺激组再灌注各时点的8-ohdG含量均较单纯造模组及毁损小脑顶核组减<WP=6>少(P<0.01),而单纯造模组与毁损小脑顶核组的8-ohdG含量无显著性差异。(2)单纯造模组及毁损小脑顶核组脑缺血/再灌注后rOGG1的转录水平相似,再灌注后6小时其rOGG1mRNA几乎检测不到,随时间的增加其转录水平有所增加,但仍较假手术组及预刺激组低(P<0.01)。预刺激组再灌注后6小时其rOGG1mRNA的表达量与假手术组无显著性差异,但再灌注后24小时及48小时其rOGG1mRNA的表达量均较假手术组增加(P<0.01)。(3)单纯造模组及毁损小脑顶核组缺血/再灌注后各时点Ku70mRNA的表达无显著性差异,但均较预刺激组及假手术组明显减少(P<0.01),而预刺激组除缺血/再灌注后6小时Ku70mRNA的表达较假手术组减少(P<0.01)外,余时点与假手术组Ku70mRNA表达无明显差异。(4)假手术组基底节区仅见1-5个Tunel阳性细胞,余下三组在缺血再灌注各时点Tunel阳性细胞数均较假手术组显著增多(P<0.01),预刺激组Tunel阳性细胞数较未给预电刺激的两组明显减少(P<0.01)。未给预电刺激的两组其Tunel阳性细胞数无明显差异。结论 (1)大鼠脑缺血/再灌注后脑缺血区存在DNA氧化性损伤。(2)大鼠脑缺血/再灌注后缺血区神经元凋亡与神经元DNA修复酶活性下降有关。(3)预电刺激小脑顶核能减少缺血区神经元凋亡可能与DNA修复酶活性上调有关。