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目的:应用酵母双杂交技术自胃癌细胞cDNA文库中筛选人TFF3(humantrefoil factor 3,hTFF3)相互作用蛋白基因,并以反向酵母双杂交方法验证候选结合蛋白。探讨hTFF3在胃癌发生、发展中可能存在的分子作用机制。方法:从胃癌细胞系SGC7901中提取总RNA,利用RT-PCR法扩增hTFF3基因,将hTFF3基因定向克隆到酵母表达载体pDEST32,命名pDEST32-hTFF3,Western blot法验证其在酵母中的表达。酵母双杂交系统筛选人胃癌细胞cDNA文库,提取阳性克隆进行质粒DNA测序,并进行生物信息学分析。根据正向双杂交筛选结果,将筛选出的醛酮还原酶1C1(AKR1C1)、核不均—核糖核蛋白Al(hnRNP A1)、β-arrestin-1(ARRB1)、伴侣素TCP1-γ(CCT_γ)蛋白基因进行PCR扩增,并与hTFF3基因分别定向克隆到pDEST32及pDEST22载体中构建诱饵及猎物质粒。反向酵母双杂交方法验证正向筛选结果的可靠性及正确性。结果:成功以RT-PCR法扩增获得hTFF3基因,构建pDEST32-hTFF3表达载体。以hTFF3为靶基因经酵母双杂交实验自胃癌细胞cDNA文库中筛选后获得了21个可能与hTFF3发生特异性相互作用的阳性克隆,12个克隆成功测序,其中6个阳性克隆的猎物载体内插入基因为己知蛋白基因,分别为醛酮还原酶A1C1、核不均—核糖核蛋白A1、免疫球蛋白重链恒定区α2链、伴侣素TCPl-γ、β-arrestin-1、硒蛋白W1,其余6个阳性克隆为未知功能基因。将筛选出的醛酮还原酶A1C1、核不均—核糖核蛋白A1、β-arrestin-1、伴侣素TCP1-γ基因与hTFF3基因进行反向酵母双杂交,结果证明这四种宿主多肽/蛋白可以与hTFF3发生相互作用。结论:筛选并验证了四种宿主多肽/蛋白可以与hTFF3相互作用,分别为醛酮还原酶A1C1、核不均—核糖核蛋白A1、β-arrestin-1、伴侣素TCP1-γ,为hTFF3与胃癌发生发展关系提供新的研究线索。