β-tubulin-Ⅲ在非小细胞肺癌组织的表达及其与临床疗效的关系研究

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[目的]:研究非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer NSCLC)中B-微管蛋白-Ⅲ(Class Ⅲ beta tubulin β-tubulin-Ⅲ)的表达水平,探讨其与肺癌患者临床病理特征的关系;探讨其与患者临床疗效的关系。[方法]:1.应用昆明医科大学第三附属医院的联众医院数字化病案检索系统筛查2007年3月1日~2009年3月30日期间就诊于胸外科、胸心血管外科行手术治疗的患者,其中Ib期及其以上患者术后行4周期多西他赛联合顺铂化疗方案。收集内容包括性别、年龄、临床分期、病理分级、吸烟史、组织学类型及淋巴结是否转移等。并收集同期行手术治疗的肺部良性疾病患者。2.于昆明医科大学第三附属医院病理科调取符合条件的83例NSCLC癌组织及癌旁组织蜡块,并调取同时期行手术治疗的20例肺部良性组织病变的蜡块。应用免疫组织化学法(Immunohistochemistry IHC)检测β-tubulin-Ⅲ的蛋白表达水平。于云南省肿瘤研究所标本库调取符合条件的83例NSCLC癌组织及癌旁新鲜冰冻组织,并调取同时期行手术治疗的20例肺部良性组织病变的新鲜冰冻组织,应用实时定量聚合酶链式反应(Real time quantitative-polymerase chain reaction RT-PCR)法检测β-tubulin-ⅢmRNA表达水平。3.分析β-tubulin-Ⅲ基因蛋白表达水平与临床病理特征的关系(性别、年龄、临床分期、病理分级、吸烟史、组织学类型及淋巴结是否转移),分析其与患者生存率的关系。[结果]:1.应用免疫组织化学法检测β-tubulin-Ⅲ的蛋白表达水平显示,β-tubulin-Ⅲ在肿瘤细胞胞浆内表达,出现清晰棕黄色颗粒着色为阳性细胞。检测NSCLC癌组织83例,其中56例B-tubulin-III表达阳性,阳性表达率为67.45%;检测NSCLC癌旁组织83例,其中34例B-tubulin-Ⅲ表达阳性,阳性表达率为40.96%;检测肺部良性病变组织20例,其中7例B-tubulin-Ⅲ表达阳性,阳性表达率为35.00%。NSCLC癌组织B-tubulin-Ⅲ蛋白表达高于肺癌旁组织和肺部良性病变组织(P<0.05)。应用RT-PCR法检测其中肺癌组的平均△Ct为2.66±0.77,癌旁组的平均△Ct为3.99±0.79,良性病变组为4.52±1.06;肺癌组相对于癌旁组的平均2-△△C为5.44±1.12,肺癌组相对于良性病变组的平均2-△△C为2.17±0.59,癌旁组相对于良性病变组的平均2-△AC为2.884±0.93。NSCLC癌组织B-tubulin-Ⅲ蛋白基因表达高于肺癌旁组织和部良性病变组织(P<0.05)。2.经IMH和RT-PCR法检测,B-tubulin-Ⅲ蛋白基因表达与病理分级、TNM分期有关,有统计学差异(P<0.05)。B-tubulin-Ⅲ蛋白基因表达与年龄、性别、吸烟史、组织学类型、淋巴结转移无明显关系。3. B-tubulin-Ⅲ表达阳性患者的术后3年生存率分别为14.28%。阴性患者术后3年生存率为37.04%。结果显示两组患者的生存曲线分布有统计学差异,Log-rank法检验统计量X2=3.912,P<0.05。[结论]:1.经IMH和RT-PCR法检测,β-tubulin-III基因蛋白表达在NSCLC癌组织中阳性表达率高于癌旁组织及肺部良性组织,可能提示其在癌症的发生过程中起一定作用。2. β-tubulin-III基因蛋白表达水平随组织分化程度降低而增高;随TNM分期增高而增高,可能提示其在癌症发生、发展过程中起一定作用。3. β-tubulin-III基因蛋白表达水平与年龄、性别、吸烟史、组织学类型、淋巴结转移无明显关系。4. β-tubulin-III表达阴性的患者预后优于B-tubulin-III表达阳性的患者,可以提示其是判断肺癌预后的一个重要因素。
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