本文旨在研究鱼类加工后下脚料在肝素类物质提取中的应用，以及绿色、高效肝素提取方法的开发，共分为三部分，主要研究内容如下:　　1、优化以鱼皮、鱼骨为原料开发更高效的肝素类物质提取方法，提取率可达48.2 mg/100 g。傅里叶近红外光谱分析经优化后得到的肝素类物质结构，结果显示使用超声辅助提取得到的样品特征基团均存在;并获得了制备低分子量肝素类物质的方法。　　2、研究以鲫鱼和鲣鱼内脏开发提取肝素的方法，探究将鱼类加工下脚料作为肝素提取来源的可行性。猪小肠肝素提取率高于两种鱼内脏来源肝素;聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳和凝胶渗透液相色谱(GPC)结果显示，鲫鱼和鲣鱼内脏来源肝素与猪小肠肝素分子量和纯度相近。一维、二维核磁结果表明，鲫鱼和鲣鱼内脏来源肝素、猪小肠来源肝素的主要单糖组成符合肝素的结构特性。亲水作用色谱-傅里叶变换质谱联用仪(HILIC-FT MS)分析肝素的寡糖结果显示，鲫鱼和鲣鱼肝素含有相同数量的寡糖分子，并且寡糖分布较相似，但平均相对分子质量比猪小肠来源肝素高，猪小肠来源肝素寡糖分子种类最少，而且寡糖中还原性末端不饱和的寡糖较多。　　3、建立一个新的同时提取精制肝素的方法，开发采用甲壳素辅助提取并精制肝素的新型绿色高效方法。监测提取过程中蛋白和糖类物质结果显示，肝素以蛋白聚糖的形式被二次洗脱得到，进一步脱蛋白后得到较高纯度的肝素。新方法绿色高效，极大地缩短了样品的提取时间;主要单糖含量比例接近1∶1的理论值，磺酸基含量高于传统方法提取的肝素，说明甲壳素对肝素特异性生物活性息息相关的磺酸基有保护作用，肝素质量也得以保证。纯度测定和分子量分析结果显示两种肝素分子量和纯度相近。核磁共振分析结果显示，两种肝素的两种主要单糖GlcNs6s和IdoA2s比例接近1∶1的理论值，均符合肝素的基本特点。HILIC-FT-MS分析肝素寡糖结果显示，两种肝素分别被酶解为不同聚合度的寡糖，但主要寡糖含量和平均相对分子质量都较接近，聚合度较大的寡糖中甲壳素提取的肝素寡糖硫酸化程度较高，该结果与核磁分析结果一致。因此，甲壳素提取肝素的方法可以实现肝素类物质的绿色、高效同步提取精制。