淋巴细胞发育相关基因在鼻腔NK/T细胞淋巴瘤中的表达及意义研究

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随着技术的进步和我们对疾病本质的认识加深,对疾病的分类尤其是肿瘤的分类已经从过去单纯基于形态的划分完善为综合临床、形态学、免疫表型和分子遗传学特征的分类。在这样的背景下,2001年WHO淋巴造血组织肿瘤新分类中,正式确立了“结外NK/T细胞淋巴瘤,鼻型”这一类恶性淋巴瘤。目前对其诊断除依据临床和组织学特征,最典型的免疫标记为CD2+,CD56+,表面CD3-和胞质CD3ε+,大部分病例细胞毒性颗粒相关蛋白阳性(如粒酶B,TIA-1和穿孔素)。迄今为止,对于鼻腔NK/T细胞淋巴瘤(nasal NK/T cell lymphoma, N-NK/T-L)的基因突变和染色体改变的研究资料有限。因此,为了更好地阐明疾病本质和正确诊断疾病,探索N-NK/T-L特异的基因改变及其特异性分子标记具有非常重要的意义。在最近的研究中,本研究组发现T-bet基因在N-NK/T-L肿瘤细胞中存在基因扩增和过表达。T-bet基因在NK细胞和CD8+T细胞的发育、分化、成熟和细胞毒功能调节中起重要作用。基础研究发现与T-bet基因同属T-box基因家族的EOMES基因,以及ETS家族的ETS-1和MEF基因在NK细胞和CD8+T细胞的发育和细胞毒免疫效应功能中起相似的调节作用,包括IFN-γ、穿孔素(perforin)和粒酶B(granzyme B)的产生。为了进一步探索N-NK/T-L特异性分子遗传学改变,在过去研究的基础上,对T-bet基因功能密切相关的EOMES、ETS-1和MEF基因在N-NK/T-L的改变情况进行了进一步调查。通过对25例N-NK/T-L;对照组相同部位的B细胞淋巴瘤(BCL)11例,T细胞淋巴瘤(TCL)6例以及正常脾组织3例和慢性炎性鼻黏膜组织5例的原位杂交检测,结果如下:1.EOMES基因在25例N-NK/T-L中阳性率为100%,多为中度和强阳性。对照组11例BCL中4例弱阳性、6例中度阳性;6例TCL中4例弱阳性,1例中度阳性。在表达强度方面,N-NK/T-L组与对照组B和T细胞淋巴瘤相比较差异有统计学意义(P=0.0029(BCL),P=0.0010(TCL))。3例正常脾和5例慢性炎性鼻粘膜组织中各有2例呈弱或中度阳性表达。2.ETS-1基因在25例N-NK/T-L和各对照组阳性表达率均为100%,表达强度差异没有统计学意义。3.MEF基因在25例N-NK/T-L中24例阳性(96%),其中弱阳性7例、中度阳性11例、强阳性6例;对照组11例BCL中2例弱阳性、7例中度阳性;6例TCL中2例弱阳性,1例中度阳性。在表达强度上,N-NK/T-L组与对照组BCL比较差异没有统计学意义(P=0.1620),与TCL比较差异有统计学意义(P=0.0050)。3例脾组织中1例中度阳性,5例慢性炎性鼻粘膜组织中1例弱阳性。4.EOMES基因和MEF基因在本研究N-NK/T-L组和对照组共50例中的表达相关性具有统计学意义(P<0.0001)。另外,我们分析了前次T-bet基因研究与本次实验重复的40例病例,EOMES基因和MEF基因与T-bet基因表达的相关性均具有统计学意义。综上所述,EOMES和MEF基因在N-NK/T-L中的表达没有明显特异性,但在N-NK/T-L中表达强度明显高于对照组,参考二者的功能,在N-NK/T-L中的高表达提示它们可能在该肿瘤组织坏死中和肿瘤发生中起重要作用。而ETS-1基因在N-NK/T-L和对照组中普遍表达,提示其可能在淋巴造血系统的发育和功能方面起基础性的共同通路的作用。
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