基于肥大细胞介导脐疗治疗腹泻型肠易激综合征的效应机制研究

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目的:1.验证脐疗治疗腹泻型肠易激综合征(diarrhea-predominant irritable bowelsyndrome,IBS-D)的有效性。2.通过观察脐疗对腹泻型肠易激综合征大鼠神阙穴区、结肠肥大细胞(mast cell,MC)数目及Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)、瞬时感受器电位V亚家族(transientreceptor potential vanilloid,TRPV)表达的影响,探讨脐疗效应与穴区、靶器官肥大细胞的关系,进而从肥大细胞角度阐释脐疗治疗IBS-D效应机制。方法:1.将大鼠随机分为正常组、模型组、隔药灸脐组、药物敷贴组、艾条灸脐组5组。除正常组外,其余4组均建立IBS-D模型。造模成功后,正常组与模型组不做任何治疗,仅做与其余各组同步的抓取固定;隔药灸脐组、药物敷贴组、艾条灸脐组分别采用隔药灸脐法、药物敷贴法、艾条灸脐法进行治疗。治疗开始10天后各组进行评估及检测。2.对大鼠症状、结肠运动及肠道敏感性进行评估,包括精神状态、皮毛色泽、饮食、体质量增长率、排便情况、粪便性状、粪便含水量、腹壁撤退反射等,并比较各组差异。3.采用改良甲苯胺蓝染色法、免疫组化法等方法,检测大鼠神阙穴区和结肠肥大细胞数目、TLRs中的Toll样受体2(Toll-like receptor2,TLR2)、Toll样受体4(Toll-likereceptor4,TLR4)表达及TRPV中的辣椒素受体(transient receptor potential vanilloid1,TRPV1)、香草酸样受体蛋白1(transient receptor potential vanilloid2,TRPV2)、香草素受体4(transient receptor potential vanilloid4,TRPV4)表达,并比较各组差异。结果:1.IBS-D模型大鼠在症状、结肠运动及肠道敏感性方面较健康大鼠均有不良改变。在改善IBS-D模型大鼠症状、结肠运动及肠道敏感性方面,隔药灸脐组、药物敷贴组、艾条灸脐组均优于模型组(P<0.05),隔药灸脐组优于药物敷贴组和艾条灸脐组(P<0.05)。2.在神阙穴区肥大细胞数目及TLR2、TLR4、TRPV1、TRPV4表达方面,隔药灸脐组、药物敷贴组、艾条灸脐组均高于模型组(P<0.05),隔药灸脐组高于药物敷贴组和艾条灸脐组(P<0.05);在神阙穴区TRPV2表达方面,隔药灸脐组、药物敷贴组、艾条灸脐组均高于模型组(P<0.05),隔药灸脐组和艾条灸脐组均高于药物敷贴组(P<0.05);在结肠肥大细胞数目及TLR2、TLR4、TRPV1、TRPV2、TRPV4表达方面,隔药灸脐组、药物敷贴组、艾条灸脐组均低于模型组(P<0.05),隔药灸脐组低于药物敷贴组和艾条灸脐组(P<0.05)。结论:1.隔药灸脐法、药物敷贴法、艾条灸脐法能够改善IBS-D模型大鼠症状、结肠运动及肠道敏感性。2.隔药灸脐法、药物敷贴法、艾条灸脐法能够提高IBS-D模型大鼠穴区肥大细胞数目及TLRs、TRPV受体表达。3.隔药灸脐法、药物敷贴法、艾条灸脐法能够降低IBS-D模型大鼠靶器官肥大细胞数目及TLRs、TRPV受体表达。4.隔药灸脐法治疗IBS-D疗效最佳。
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