目的:重症急性胰腺炎(SAP)是临床上常见的一种急腹症,常伴有全身炎症性反应甚至重要器官功能衰竭等并发症的发生。目前,SAP的死亡率仍高达20%-30%。长期以来,急性胰腺炎早期治疗的策略一直以对症支持治疗为主,尚缺乏特异性的治疗手段。我们先前的研究表明,早期腹腔穿刺引流术(APD)可以通过引出胰腺炎性相关腹水(PAAF),降低血液和腹水中促炎因子的浓度,来有效控制SAP过程中的炎症反应程度,进而达到治疗SAP的目的。然而,对于通过APD治疗SAP的潜在机制尚缺乏进一步的探索。业已证实,胰腺组织细胞凋亡是SAP发病过程中的关键病理变化之一,它对胰腺组织细胞的损伤有着重要的保护作用。据此,本研究旨在探讨APD治疗SAP过程中胰腺组织细胞凋亡情况及其潜在的分子机制。方法:将8周龄约200g的雄性成年SD大鼠随机分为SO组(假手术组)、SAP组、APD组,每组18只。三组大鼠分别按下列方法制备研究模型。SAP组,大鼠通过胰胆管逆行注射5%硫磺胆酸钠诱导重症急性胰腺炎模型。APD组,按上述方法制备重症急性胰腺炎模型后,立即将一引流管置入腹腔内以备后续引流出胰源性腹水;引流管固定于大鼠右下腹。SO组,打开腹腔后,仅轻柔翻动胰腺,不进行任何手术操作,关腹。每组于术后6h、12h、24h,获取大鼠腹主动脉血和胰腺组织。采用HE染色对各组大鼠胰腺组织进行病理学评分并计算胰腺组织细胞坏死率,以评估APD治疗SAP时对胰腺组织损伤程度的影响。运用血生化法检测各组大鼠血清中淀粉酶、炎性因子(肿瘤坏死因子-α、IL-1β、IL-6)及内毒素的浓度变化情况,来判断APD治疗SAP时对全身炎症反应程度的影响。通过TUNEL染色检测各组大鼠胰腺组织细胞凋亡情况;并采用蛋白免疫印迹法和免疫组织化学染色法检测胰腺组织中细胞凋亡相关蛋白的表达规律情况。蛋白免疫印迹法检测以及PI3K/AKT信号通路的变化情况。结果:(1)在三组动物模型中,SAP组和APD组大鼠胰腺组织损伤程度及全身炎症反应在各个时间点较SO组均明显加重;而与SAP组比较,APD组大鼠胰腺组织损伤程度显著减轻,且血清中淀粉酶、内毒素、肿瘤坏死因子-α、IL-1β和IL-6的水平也明显降低。(2)与SAP组比较,APD组大鼠胰腺组织中细胞凋亡数量增多,而胰腺组织细胞坏死程度则明显减轻;在SO组未观察到明显的胰腺组织细胞凋亡及坏死发生。此外,蛋白免疫印记与组织化学染色结果发现,APD组大鼠胰腺组织内促凋亡蛋白(Cleaved-caspase-3和bax)较SAP组明显增加,而抗凋亡蛋白(Bcl-2)则显著降低。(3)通过蛋白免疫印迹法进一步发现,APD组大鼠胰腺组织细胞内的PI3K/AKT信号通路磷酸化激活程度较SAP组显著降低。(4)通过回输PAAF与PAAF+PI3K抑制剂渥曼青霉素于轻型胰腺炎大鼠腹腔内发现,PAAF能够通过促进PI3K/AKT信号通路的磷酸化激活,来抑制胰腺组织的细胞凋亡,进而加重急性胰腺炎的胰腺组织损伤及全身炎症反应。结论:上述研究结果表明,在SAP治疗过程中,APD可通过引流出PAAF中的有毒物质,来抑制胰腺组织中PI3K/AKT信号通路磷酸化激活,从而增强胰腺组织细胞凋亡,减轻SAP过程中胰腺组织损伤与全身炎症反应程度。本研究为阐明APD在SAP患者治疗中的作用机制提供了新的见解。