【摘 要】
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消化系统是宿主与其环境之间最大的屏障,它拥有一个完整的屏障框架,以保护宿主免受外部毒物,膳食抗原,微生物和其他可能有害的物质的侵害。这种保护是多种多样的,涉及不同的防御机制,例如粘膜层,不断代谢的上皮细胞和紧密连接(TJs)。如今,由于长期高脂肪饮食(HFD)引起的肥胖和肥胖相关的代谢疾病是世界上的重大问题。动物研究的证据表明,HFD诱导肠道生态失调,炎症反应,氧化应激和增加肠道通透性。肠道屏障系
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消化系统是宿主与其环境之间最大的屏障,它拥有一个完整的屏障框架,以保护宿主免受外部毒物,膳食抗原,微生物和其他可能有害的物质的侵害。这种保护是多种多样的,涉及不同的防御机制,例如粘膜层,不断代谢的上皮细胞和紧密连接(TJs)。如今,由于长期高脂肪饮食(HFD)引起的肥胖和肥胖相关的代谢疾病是世界上的重大问题。动物研究的证据表明,HFD诱导肠道生态失调,炎症反应,氧化应激和增加肠道通透性。肠道屏障系统调节宿主防御机制以保护宿主免受外部毒物的侵害,但HFD通过刺激促炎信号级联直接增加肠道通透性,并间接通过激活屏障破坏细胞因子增加肠道通透性。TRIM67基因是TRIM家族蛋白质的成员,TRIM家族蛋白参与细胞周期停滞、细胞凋亡、DNA修复和衰老等重要的细胞过程。据我们所知,没有研究阐明TRIM67在HFD诱导肥胖小鼠回肠中的保护作用。本研究的目的是揭示TRIM67对肥胖诱导小鼠回肠炎症、氧化应激和屏障功能的改善作用。在本研究中通过在野生型(WT)和敲除(KO)小鼠中使用HFD饮食14周成功构建肥胖模型。通过使用包括H&E,PAS和Masson染色来观察回肠的组织形态学变化。通过荧光定量PCR(q PCR)和蛋白质免疫印迹检查TRIM67基因缺失对肥胖小鼠肠道炎症,抗氧化酶活性和肠道屏障功能的影响。主要实验结果如下。1.高脂肪饮食对TRIM67表达的影响及肥胖模型构建成功HFD喂养14周后,与对照(CTR)饮食喂养的小鼠相比,用HFD喂养的小鼠体重显着增加。HFD增加了WT和KO小鼠的血糖水平,而对照饮食喂养的KO小鼠的血糖水平没有增加,并且表明TRIM67对血糖没有显着影响。此外,与WT CTR饮食小鼠相比,用HFD喂养的WT小鼠中的TRIM67表达下调。2.TRIM67缺失诱导肥胖小鼠回肠组织病理学损伤组织病理学观察表明,KO小鼠和HFD喂养小鼠表现出病理损伤,包括绒毛的缩短和变钝以及隐窝深度的减少。而且,用HFD喂养的KO小鼠的杯状细胞数量减少和轻度纤维化。3.TRIM67的缺失加剧肥胖诱导回肠中的炎症反应TRIM67缺失加剧肥胖诱导小鼠回肠中的肠炎症反应。包括TNF-α,IL-6,IL-1β和IL-2在内的炎性细胞因子的分析表明,与WT CTR组相比,KO CTR组中这些细胞因子的m RNA表达高。此外,与CTR组相比,HFD组(WT和KO)的m RNA表达量高。与WT HFD小鼠相比,KO HFD小鼠的IL-1β和IL-2m RNA表达上调。Western印迹(WB)结果显示KO HFD小鼠中TNF-α,IL-6和IL-1的蛋白表达量增加;与CTR组相比,HFD组小鼠抗炎细胞因子(IL-4和IL10)的m RNA表达受到抑制,IL-10和IL-4的蛋白表达水平表明,与所有其他组相比,KO HFD组的表达最低。4.TRIM67缺失加剧肥胖小鼠回肠的屏障破坏本研究发现,用HFD喂养的WT和KO小鼠中claudin-1,occludin和ZO-1的m RNA表达下调,但KO CTR和KO HFD小鼠之间occludin的m RNA表达没有显着差异。此外,与WT CTR组相比,KO CTR饮食组中紧密连接蛋白的表达下调。WB结果表明,KO HFD组的相对蛋白表达水平比实验的所有其他组都受到抑制。5.TRIM67缺失加剧肥胖小鼠回肠中的氧化应激与CTR组相比,HFD组中抗氧化酶SOD-1和SOD-2的m RNA表达降低。此外,HFD组中用试剂盒检测的SOD活力和GSH含量都显著下调,WT CTR组和KO CTR组的SOD活力没有显着差异,而KO CTR组的GSH含量与WT CTR组相比显著下降。总之,我们的数据提供了关于TRIM67在肥胖小鼠回肠中的保护作用的重要见解。我们证明TRIM67可以防止肠道炎症,保持肠道完整性,并减少HFD喂养引起的氧化应激。此外,需要更多的分析和临床试验来阐明TRIM67作为保护标志物的机制,因为近年来肥胖和肥胖相关的代谢疾病逐渐增加,TRIM67可能是有价值的治疗靶标。
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