背景:上皮性卵巢癌是目前为止全世界最致命的妇科恶性肿瘤。对于患者来说,卵巢癌的常规治疗是肿瘤细胞减灭术,术后联合铂类与紫杉醇的一线化疗方案。卵巢癌患者对于铂和紫杉醇一线化疗的临床反应率大约有80%。虽然具有高的响应率,但是上皮性卵巢癌的耐药性较高,预后性差,晚期卵巢癌患者5年的生存率小于30%。耐药性的产生与细胞内铂类药物摄入的减少、解毒的能力增强、凋亡途径异常以及DNA损伤后DNA修复能力的增强等相关。其中,顺铂摄取的抑制被认为是卵巢癌顺铂耐药的主要原因,它通常发生在卵巢恶性肿瘤的恶性转化过程中。细胞膜上的铜转运体1（CTR1）是一种铜离子的转运体,在调节铜的稳态过程中起着关键作用,同时也是酵母和哺乳动物中摄取顺铂的关键分子。核心岩藻糖基化是由核心岩藻糖基转移酶（Fut 8）催化下进行的。核心岩藻糖基化通过改变糖蛋白的构象、定位及表达,在细胞内发挥重要生理作用。核心岩藻糖基化可以调节细胞表面蛋白CTR1与铂类之间的相互作用,进而影响癌细胞的铂类药物摄取及耐药性的获得。CTR1介导的顺铂摄取依赖于其金属结合外显子结构域,由于该结构域具有N-糖基化位点,推测N-糖基化与顺铂摄入密切相关,而CTR1核心岩藻糖基化在卵巢癌中的顺铂摄取和铂的耐药作用机理尚未阐明。目的:阐明CTR1核心岩藻糖基化与卵巢癌顺铂耐药机制的相关性。方法:通过凝集素印记方法检测卵巢癌患者和正常人血清之间核心岩藻糖基化水平差异。通过凝集素印记、qPCR、MTT、细胞周期以及细胞凋亡等实验方法检测顺铂敏感型细胞与顺铂耐药性细胞对顺铂的敏感性。在卵巢癌患者的病理切片中,通过免疫组化的方法检测癌组织与癌旁组织的CTR1的表达的差异,同时,用流式细胞术、免疫沉淀、电感耦合等离子体质谱以及检测CTR1与顺铂之间的相互作用。然后,通过构建核心岩藻糖敲除的特定细胞系以及恢复模型,进一步的验证核心岩藻糖基修饰与顺铂耐药性之间的关系。最后,利用磷酸化的实验,研究卵巢癌细胞以及小鼠的卵巢上皮细胞的信号转导通路。结果:在血清的检测中,与正常人相比,卵巢癌患者的血清中核心岩藻糖基化水平明显增多。顺铂化疗的患者血清中核心岩藻糖基化水平明显高于正常人和未经过化疗的患者的血清。在卵巢癌的细胞系中,顺铂耐药型细胞的核心岩藻糖基化水平明显高于顺铂敏感型细胞,并且,经过顺铂处理之后,与敏感性细胞相比,耐药型细胞的存活率高、细胞凋亡率低。虽然CTR1在细胞膜上的表达在两种细胞中无明显的差异,但顺铂耐药型细胞的核心岩藻糖基化水平要明显的高于顺铂敏感型细胞。与顺铂敏感型细胞相比,顺铂耐药型细胞膜表面CTR1与顺铂之间的相互作用明显减弱。还有,在顺铂耐药型细胞中,铂的吸收量明显低于顺铂敏感型细胞。在小鼠卵巢上皮细胞中,核心岩藻糖基化修饰的缺失促进细胞对顺铂的摄取。结论:顺铂耐药型细胞中CTR1的核心岩藻糖基化水平显著高于顺铂敏感型细胞。高核岩藻糖基化抑制了CTR1与顺铂的相互作用及顺铂摄取。Fut8^+/+卵巢上皮细胞相比,在Fut8^-/-小鼠卵巢上皮细胞中顺铂的摄取量明显增多,而在Fut8基因恢复细胞模型中顺铂的摄取量下降。此外,核心岩藻糖基化还可以调节顺铂抗性相关分子（如AKT、ERK、JNK、mTOR）的磷酸化。本研究阐明了CTR1核心岩藻糖基化在细胞摄取顺铂过程中的重要调节作用机理,从糖基化角度为提高顺铂化疗效果提供新思路。