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烯醇化酶磷酸酶1(Enolase-phosphatase 1 ENOPH1)是甲硫氨酸补救途径的重要蛋白分子,具有磷酸酶功能,属于非典型烯醇化酶活性的双功能酶,在调节氧化应激反应中发挥着重要作用。本次研究探究的是ENOPH1在急性缺血性脑卒中血脑屏障损伤中扮演的角色。前期研究发现:局灶性脑缺血可诱导大鼠脑微血管组织中ENOPH1的mRNA和蛋白表达水平增高。本研究通过乳酸脱氢酶释放法及TUNEL法检测到3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴化物有所增加,提示缺血缺氧条件(oxygen-glucose deprivation,OGD)下,脑微血管内皮细胞(bEND3 cells)内ENOPH1的mRNA和蛋白表达水平上调,同时伴随着细胞凋亡增加。通过质粒转染法敲低ENOPH1和过表达ENOPH1蛋白水平可分别减少和增加OGD诱导下内皮细胞凋亡,甚至,大幅度扩大或减少氧化应激反应内凋亡相关蛋白(如caspase-3,PARP,Bcl-2 and Bax)和内质网应激蛋白(Ire-1,Calnexin,GRP78 and PERK)的表达水平。同样发现OGD条件下还可诱导ENOPH1下游蛋白分子乙酸二羟丙烯醛加双氧酶(acireductone dioxygenase 1,ADI1)表达水平上调,并且OGD可促进ENOPH1与ADI1之间的相互作用。但有趣的是,敲低ENOPH1并未参与OGD诱导下ADI1蛋白表达水平上调,而只是调节ADI1从细胞核向细胞质转运的过程。最后还发现敲低ENOPH1可显著降低OGD诱导的内皮细胞通透性增加。由此,本研究得出的结论是:ENOPH1的激活通过促进氧化应激反应,增加促凋亡相关蛋白的表达,从而加重OGD诱导下内皮细胞凋亡和血脑屏障损伤。因此,ENOPH1是治疗急性缺血性脑卒中新的靶点。