目的：探讨电针(electro-acupuncture, EA)联合神经生长因子(nerve growth factor, NGF)对脑缺血再灌注损伤后大鼠内源性神经干细胞的增殖、迁移、分化的影响。通过实验,提供更多关于开发脑保护药物的依据,同时也为电针和神经生长因子在促进缺血性脑梗死后,对恢复神经功能方面提供临床理论根据。方法：动物选取SPF级雄性SD大鼠,数量是150只,模型的制备方法是线栓法,制作的模型要求是大鼠大脑中动脉闭塞模型(middle cerebral artery occlusion, MCAO),随机分为假手术组(Sham group)、模型组(MCAO group)、电针组(EA group)、神经生长因子组(NGF group)和电针联合神经生长因子组(EA+NGF group),进行脑梗死再灌注损伤后神经功能缺失评分,通过氯化三苯四氮唑(TTC)染色法检测大鼠脑梗死体积；尼氏染色法检测海马神经元数目；然后再用免疫组织化学法进行检测,以便能够更好地观察大鼠脑缺血后第1d、7d与14d这三个规定的时间段、不同脑的对应部位内源性神经干细胞相关标记蛋白Nestin、PSA-NCAM、BrdU、GFAP、NeuN等标志物的免疫阳性细胞数表达；免疫荧光双抗标记检测,标记Nestin/BrdU细胞、NeuN/BrdU细胞、GFAP/BrdU细胞、PSA-NCAM/BrdU细胞以确定BrdU标记细胞的增殖、分化和迁移情况。结果：1.神经功能损伤评分：对分组的方差分析,F=67.619,P=0.00<0.05,说明各组间有统计学差异。时间点多重比较,在1d、3d、7d三个时间点间,除1d和3d之间有统计学差异外(p=0.016<0.05),其余各时间点间均无统计学差异(p>0.05)。组间多重比较,各组间除模型组和电针组(p=0.345)、电针组和神经生长因子组(p=1.000)、神经生长因子组和电针加神经生长因子组(p=0.181)之间无统计学差异外,其余各组间均有统计学差异(p<0.05)。实验前各组大鼠行为能力正常。假手术组未见行为异常表现,神经功能评分均为0分；模型组大鼠进食减少、体重下降、活动减少。观察至7d时,大鼠神经功能缺失症状较前有好转。2.TTC脑梗塞体积检测：对分组的方差分析,P=0.00<0.05,说明各组间有统计学差异。组间多重比较示各组间均有统计学差异(p<0.05)。各测量时点组间均值两两比较(即分别比较1d、3d、7d各组间的数据)结果显示P<0.05,各组间有统计学差异。电针组和神经生长因子治疗组经功能损伤评分显著低于模型组(P<0.01)。缺血可引起脑神经功能严重缺失,电针及神经生长因子对脑缺血恢复有一定作用。3.尼氏染色神经元数目：对分组的方差分析,F=32.184,P=0.000<0.05,说明各组间有统计学差异。各时间点上各组之间的比较(即分别比较1d、7d、14d各组间的数据)结果显示P<0.05,各组间有统计学差异。组间多重比较各组间比较模型组和神经生长因子组(p=0.018)、电针加神经生长因子组与其它各组(p=0.00<0.05)之间有统计学差异外,其余各组间均无统计学差异(p>0.05)。缺血侧脑组织尼氏染色显示,假手术组海马CA1区细胞层次清楚,细胞结构完整,胞质均匀,胞核圆大。模型组缺血侧海马CA1区细胞排列紊乱、形态不规则,细胞缺失,胞核固缩。电针和神经生长因子治疗组缺血侧相应区域细胞排列较规整,形态基本正常,细胞略有丢失。与脑梗死组比较,电针组、神经生长因子组海马神经元数目减少明显(P<0.05)4.免疫组织化学法、免疫荧光法：(1) Nestin阳性细胞数表达上,对分组的方差分析,P=0.00<0.05,说明各组间有统计学差异。组间多重比较各组间均有统计学差异(p<0.05).各时间点上各组之间的比较(即分别比较1d、7d、14d各组间的数据)结果显示P<0.05,各组间有统计学差异。结果显示Nestin在假手术组几乎没有表达出来；而随着缺血时间的推移,7d对其阳性细胞进行检测,发现了阳性细胞的表达多了许多(P<0.05),14d表达是最好的,达到最大值；Nestin/BrdU标记细胞在假手术组少量表达,缺血后7d表达增加(P<0.05),14d表达达到高峰。EA组、NGF组、EA+NGF组与模型组在7d、14d时差异均有统计学意义(P<0.05)；(2) NeuN阳性细胞数表达上,对分组的方差分析,P=0.00<0.05,说明各组间有统计学差异。组间多重比较各组间均有统计学差异(p<0.05).各时间点上各组之间的比较(即分别比较1d、7d、14d各组间的数据)结果显示P<0.05,各组间有统计学差异。NeuN在假手术组表达较多,缺血后7d其阳性细胞的表达增加；NeuN/BrdU标记细胞假手术组表达较多,增加最明显的为EA组、NGF组、EA+NGF组也有明显增加,模型组增加最少；(3) GFAP阳性细胞数表达上,对分组的方差分析,P=0.00<0.05,说明各组间有统计学差异。对分组的方差分析,P=0.00<0.05,说明各组间有统计学差异。各时间点上各组之间的比较(即分别比较1d、7d、14d各组间的数据)结果显示P<0.05,各组间有统计学差异。GFAP在假手术组表达得也不少；继续追踪检测,发现缺血后7d其阳性细胞表达增加了(P<0.05),并且是成簇状分布,周围长了许多短小的突起,14d表达开始下降；GFAP/BrdU标记细胞在假手术组较多表达,缺血后7d表达增加(P<0.05),14d表达下降。与模型组相比,EA组、NGF组和EA+NGF组在7d、14d时表达减少,差异均有统计学意义(P<0.05)；(4) PSA-NCAM阳性细胞数表达上,对分组的方差分析,P=0.00<0.05,说明各组间有统计学差异。组间多重比较各组间均有统计学差异(p<0.05)。各时间点上各组之间的比较(即分别比较1d、3d、7d各组间的数据)结果显示P<0.05,各组间有统计学差异。PSA-NCAM在假手术组表达不明显,而且对其染色也不明显；同样也是在缺血后7d检测发现,其阳性细胞数量也在增加(P<0.05),成簇排列分布,周围长有小的短的突起,14d表达开始下降；PSA-NCAM/BrdU标记细胞在假手术组少量表达,缺血后7d表达增加(P<0.05),14d表达下降。EA组、NGF组、EA+NGF组与模型组在7d、14d时差异均有统计学意义(P<0.05)；结论：1、脑缺血再灌注损伤是大鼠脑内细胞再生和增殖的诱导因子,电针联合神经生长因子干预后可诱导脑内细胞再生,同时加快新生细胞的增殖,并促进新生细胞的分化;2、电针和神经生长因子联合使用的方法治疗,对缺血部位或是区域内的内源性干细胞的变为成熟的神经元细胞有促进作用,这种治疗机制对恢复神经功能有重要的作用。