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化学治疗是目前癌症治疗的主要手段之一,其中,多肽类药物因具有毒性低、靶向特异性明确和分子质量小的优点,已成为近年来抗肿瘤药物研发的热点。天然多肽类化合物来源十分广泛,尤其是海洋环境因为其生物多样性,成为天然多肽类化合物的主要来源之一。Samoamide A是从海洋束藻属藻青菌中提取的环八肽,其结构为cyclo(-[Val-Leu-Pro-Pro-Phe-Ile-Pro-Phe]-),体外活性实验表明其具有良好的细胞毒性,但是天然Samoamide A的产率很低,目前尚未发现有研究来解决这一问题,因此,为提高其产量,需要对其进一步研究。本课题采用Fmoc固相合成法,以2-氯三苯甲基氯(CTC)树脂为固相载体,Fmoc保护的苯丙氨酸、脯氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸为原料,合成直链肽,将直链肽从树脂上切割下来之后,再利用液相法环合直链肽,合成环肽Samoamide A,并对其反应溶剂、缩合剂和切割条件以及pH等条件进行优化,结果证明以60%DCM/DMF为反应溶剂,TBTU为缩合剂,TFA/EDT/PhOH/H20/硫茴香醚体积比为80:2.5:7.5:5:5的溶液为切割试剂,环合体系pH为8.0时,其合成纯度和产率最高,SamoamideA总收率可达54.5%。并通过高效液相色谱-质谱联用仪(HRMS)、核磁共振氢谱(1H NMR)和核磁共振碳谱(13C NMR)对所合成的化合物Samoamide A进行结构确证,其分子量为910.40,与理论分子量相符,核磁共振谱图分析结果表明Samoamide A合成成功,为其进一步开发利用提供了技术支撑。在前面的基础之上,为了提高Samoamide A的抗肿瘤活性,需要对Samoamide A进行改造,本文采用丙氨酸扫描法探究Samoamide A的非活性位点,用Fmoc保护的丙氨酸依次替换Samoamide A的8个氨基酸,合成方法同上一章节,得到了8条新的Samoamide A衍生物。通过HRMS、1H NMR和13C NMR对所合成的8条新的Samoamide A衍生物进行结构确证,结果证明衍生物分子量与理论分子量相符,核磁共振碳谱、氢谱分析结果也与理论一致。通过细胞毒性检测(MTT)和DPP4酶活抑制实验证明化学方法合成的Samoamide A具有良好的抗肿瘤活性,Samoamide A浓度为50 μg/mL时,4T1细胞存活率为20.79%,浓度为100 μg/mL时,DPP4酶活抑制率为85.72%。然后对8条Samoamide A衍生物的抗肿瘤活性进行分析,实验结果表明Samoamide A-6的抗肿瘤效果最好,其4T1细胞存活率最低,仅25.35%,DPP4酶活抑制率最高,为82.44%,与SamoamideA相比最为接近。因此,将该位点处的脯氨酸(Pro)替换成丙氨酸(Ala),并不会较大的影响Samoamide A的抗肿瘤活性,证明该位点为Samoamide A的非活性位点。综上所述,本课题研究出了一种新的Samoamide A合成方法,提高了其产率,并通过丙氨酸扫描和抗肿瘤活性研究,找到了Samoamide A的非活性位点,为抗肿瘤环肽Samoamide A进行后续的修饰与改造提供理论依据,具有重要的研究意义和应用价值。