【摘 要】
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毒蕈碱受体(muscarinic receptor, M受体)激动剂是以毛果芸香碱和氨甲酰胆碱为代表的一类胆碱能药物,主要用于青光眼及老年性痴呆等疾病的治疗.它们在体内主要是通过激动M受
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毒蕈碱受体(muscarinic receptor, M受体)激动剂是以毛果芸香碱和氨甲酰胆碱为代表的一类胆碱能药物,主要用于青光眼及老年性痴呆等疾病的治疗.它们在体内主要是通过激动M受体起作用的,属于G蛋白藕联的受体,分子生物学的研究表明,毒蕈碱受体可分为M1-M5五种亚型,其中M1,M3,M5与Gq/11蛋白家族藕联,M2,M4与Gi蛋白家族藕联.毒蕈碱受体在体内广泛分布,参与调节许多的生理活动和病理过程,毒蕈碱受体也是多种药物的作用靶点,其中关于毒蕈碱受体激动剂对细胞凋亡的影响是近年来研究的热点.该试验将M1-M4四种亚型的毒蕈碱受体基因分别转染到CHO-K1细胞中,建立稳定表达的含有单一M受体亚型的细胞系,并采用撤血清诱导CHO细胞凋亡的方法,对毒蕈碱受体激动剂氨甲酰胆碱保护撤血清诱导的CHO细胞凋亡作M受体亚型分析,并探讨其信号转导.结论1.将携带有M1-M4受体亚型的cDNA的质粒成功转染至CHO细胞,获得稳定的表达.2.M1受体介导毒蕈碱受体激动剂氨甲酰胆碱对撤血清诱导的CHO细胞凋亡的保护作用,此作用具有浓度依赖性和时间依赖性.阿托品可以阻断此作用.3.上述作用是通过激活M1毒蕈碱受体而升高丝裂原激活蛋白家族中的ERK1/2激酶的磷酸化水平实现的.
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