【摘 要】
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喹乙醇(Olaquindox)又称喹酰胺醇,是一种抗菌促生长剂,由德国拜耳公司于1965年以邻硝基苯胺为原料合成所得。由于喹乙醇具有抗菌和促进蛋白质合成的作用,能促进动物生长,提高饲料转化率及利用率,故而广泛用于禽畜类动物的养殖中,但是长期、大量使用易导致动物体内药物残留的积累。目前,美国和欧盟都已禁止使用喹乙醇作为饲料添加剂,中国兽药典(2005版)也明确规定,禁止将喹乙醇用于家禽和水产养殖。随
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喹乙醇(Olaquindox)又称喹酰胺醇,是一种抗菌促生长剂,由德国拜耳公司于1965年以邻硝基苯胺为原料合成所得。由于喹乙醇具有抗菌和促进蛋白质合成的作用,能促进动物生长,提高饲料转化率及利用率,故而广泛用于禽畜类动物的养殖中,但是长期、大量使用易导致动物体内药物残留的积累。目前,美国和欧盟都已禁止使用喹乙醇作为饲料添加剂,中国兽药典(2005版)也明确规定,禁止将喹乙醇用于家禽和水产养殖。随着监管要求的提高,现有方法难以满足需要,因此亟需优化确立一系列的从原药到代谢物、源头到流通环节的灵敏、可靠、应用良好的检测方法。本文利用检验检测机构常用的高效液相色谱法、液相色谱-质谱联用方法以及与企业合作建立的胶体金技术,对施药源头即饲料中的喹乙醇残留、流转环节动物源性食品中喹乙醇代谢物3-甲基-喹恶啉-2羧酸(MQCA)快检筛查及优化实验室确证方法。在此基础上,开展对市售动物源性食品MQCA风险监测。主要研究内容及结果如下:(1)优化确立了一种能快速准确测定饲料中喹乙醇残留量的HPLC法。本方法采用新的提取溶剂,与国标相比,对喹乙醇原药的提取效率更高;改进净化及浓缩步骤,使目标物损失小,效率更高,前处理时间从国标的3 h缩短至约40 min。国标方法注明的回收率范围在70%-86%。由于目标物是光敏化合物,且容易在浓缩下流失,本方法优化提取过程中的关键控制点,使回收率在96%~105%之间,重复性条件相对偏差小于2.4%,准确度与精密度均优于国标;通过优化色谱条件,选择合适的色谱柱和流动相,方法灵敏度得以提升。(2)实验室科学评价食品快检试剂盒技术(胶体金技术),通过与相关企业合作,实际推广应用MQCA快筛技术,筛查动物源性食品中喹乙醇代谢物的残留。经改良后,胶体金试纸条法有较高灵敏度和特异性,质量性能检测显示,试剂盒准确性、稳定性等指标较好,且操作简单,与仪器法相比,成本低,且分析速度快,5-8min即可用肉眼观察结果。在样品快速筛查、准确定性上优势性明显,适用于基层一线监管。(3)进一步优化了液相色谱串联质谱法,并以此确证方法测定了MQCA的残留量浓度。方法采用胰酶对化合物进行酶解,酶解效果优于国标protease蛋白酶。方法改良了提取MQCA化合物的过程,摒弃了国标方法中不适于动物源性样品类浓缩净化的SPE柱,能直接、快速的提取有利于批量样品测定;国标测定MQCA的方法缺少明确的除脂过程,难以测定高油、高脂肪的样品,本方法采用了冷冻离心与液液萃取方式除脂,对富油样品净化效果更突出,方法的重现性好。方法回收率范围为92%~101%,RSD小于4.19%,实际样品测定RSD小于3%,均优于国标。通过优化离子源及色谱条件,使目标物能在4 min快速出峰,且离子通道干净,无明显干扰物,方法灵敏度高、特异性好。(4)以上述优化方法对我市市售动物源性食品喹乙醇残留情况进行了风险监控与预警。选取了广州市11区的鸡、鸭、猪、牛中的肌肉、肝脏、肾脏组织作为监测对象。结果显示,2016至2017年,主要检出MQCA的畜禽组织部位为猪肝、猪肌肉,均未超过农业部235号公告所规定的喹乙醇标志残留物在猪肌肉和肝中的限量标准。从整体情况看,市售的动物源性食品(鸡、鸭、猪、牛)是安全的。
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