IL--8介导的中性粒细胞FOXP3表达的下调促进口腔鳞癌进展

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目的:许多研究已经证实FOXP3(叉状头/翅膀状螺旋转录因子3,forkhead box P3)除了在调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)上有表达之外,在多种肿瘤细胞中也有表达,并且不同肿瘤细胞中的FOXP3对肿瘤的进展起着不同的作用。中性粒细胞作为癌微环境中常见的免疫细胞,在不同癌微环境中,其对肿瘤的进展也起着不同的作用。然而,FOXP3在中性粒细胞上的表达及其功能并未见有相关研究。因此,本研究主要是探讨癌微环境中的中性粒细胞FOXP3的表达对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)进展的影响。  方法:1.将SCC-9(人舌鳞癌细胞系)细胞与中性粒细胞在96孔板中共培养并用人重组白细胞介素8(Interleukin-8,IL-8)处理;24小时后,CCK-8(细胞计数试剂盒,Cell Counting Kit8)法测定SCC-9细胞增殖。2.使用IL-8处理中性粒细胞,12小时后,采用实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,RT-qPCR)分析FOXP3mRNA在中性粒细胞的表达。3.将SCC-9细胞与中性粒细胞在96孔板中共培养并用P60(FOXP3特异性抑制剂)抑制FOXP3蛋白的作用;24小时后,CCK-8法测定SCC-9细胞增殖。4.收集OSCC癌组织标本,使用免疫荧光组织化学技术检测OSCC癌微环境中的中性粒细胞FOXP3蛋白的表达并分析其与OSCC患者临床分期之间的关系。5.使用免疫荧光组织化学技术检测OSCC组织中IL-8蛋白的表达。  结果:1.中性粒细胞、IL-8共同促进SCC-9细胞增殖。2.IL-8下调中性粒细胞FOXP3mRNA的表达。3.中性粒细胞FOXP3蛋白被抑制后促进SCC-9细胞增殖。4.OSCC癌微环境中的中性粒细胞FOXP3蛋白的表达在临床Ⅳ期组低于临床Ⅱ期组(P=0.001)和临床Ⅲ期组(P=0.008)。5.OSCC癌组织中IL-8蛋白的表达高于癌旁组织。  结论:癌微环境中的IL-8可以趋化中性粒细胞,且由IL-8介导的中性粒细胞FOXP3表达的下调可以促进OSCC进展。
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