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我国拥有丰富的含亚麻酸植物资源,新疆又是红花之乡,近年来对亚麻籽油、红花籽油的营养成分、含量及功能性作用研究颇多。前期研究发现,按一定比例科学配伍制成的亚麻籽红花籽调和油(Flaxseed and safflower seed blend oil,FSSBO)具有良好降血脂功能,由于高血脂症与Ⅱ型糖尿病具有互为因果的关联性,因此本文在FSSBO降血脂的前期研究基础上,进一步进行FSSBO对Ⅱ型糖尿病动物模型血糖的影响与机制研究。第一,初步探讨FSSBO对小鼠血糖的干预作用;第二,探讨不同配比亚麻籽提取物、红花籽油对Ⅱ型糖尿病小鼠血糖的影响;第三,探讨FSSBO对Ⅱ型糖尿病小鼠血糖的影响;第四,探讨FSSBO降血糖的作用机制。主要研究内容与结论如下:
(1)首先将亚麻籽油作为原料,基于课题组前期采用皂化中和纯化一体法制备亚麻籽油提取物的工艺,进一步开发出了高速剪切皂化-冷冻分离法亚麻籽油提取物制备新工艺,使用链脲佐菌素(STZ)建立小鼠糖尿病模型,对建模成功的小鼠进行随机分组,分别为高血糖对照组、红花籽油组、亚麻籽油组、亚麻籽油提取物组、FSSBO组。实验小鼠按分组灌胃给予受试物,连续14d。从小鼠体重、糖耐量、胰岛素水平等指标初步分析FSSBO的降血糖作用。
(2)基于课题组前期制备红花降脂软胶囊发现60%亚麻籽油提取物和40%红花籽油组成的比例综合降脂效果最好,应用高脂高糖乳灌胃联合腹腔小剂量多次注射STZ法实现Ⅱ型糖尿病小鼠模型的构建,分别给予剂量和配比不等的亚麻籽油提取物、红花籽油,探讨最佳配比。结果表明,60%亚麻籽油提取物和40%红花籽油复合可提高糖尿病小鼠胰岛β细胞分泌功能,改善胰岛素抵抗。
(3)基于60%亚麻籽油提取物和40%红花籽油复合(即FSSBO)具有良好的降血糖效果,再次探讨多不饱和脂肪酸对Ⅱ型糖尿病小鼠血糖的影响有无协同性,将FSSBO的降血糖作用与红花籽油、亚麻籽油、亚麻籽油提取物作比较,结果表明,FSSBO降血糖效果最佳,能使胰岛素分泌水平升高,增加胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)(P<0.05),改善胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)(P<0.01)((与模型组相比,HOMA-IR减少60.71%),提高机体对胰岛素的敏感性,从而改善Ⅱ型糖尿病小鼠糖脂代谢紊乱症状,达到降血糖效果。
(4)采用WesternBlot法检测大鼠肝脏中p-PI3K、p-Akt、p-GSK-3β蛋白的表达,初步明确FSSBO降血糖的作用机制。实验结果表明,与模型组相比,FSSBO组大鼠体重上升,但无统计学意义(P>0.05),空腹血糖及肝重指数明显降低(P<0.05或P<0.01),p-GSK-3β蛋白表达有效下调(P<0.05),p-PI3K以及p-Akt蛋白表达上调,但无统计学意义(P>0.05)。
(1)首先将亚麻籽油作为原料,基于课题组前期采用皂化中和纯化一体法制备亚麻籽油提取物的工艺,进一步开发出了高速剪切皂化-冷冻分离法亚麻籽油提取物制备新工艺,使用链脲佐菌素(STZ)建立小鼠糖尿病模型,对建模成功的小鼠进行随机分组,分别为高血糖对照组、红花籽油组、亚麻籽油组、亚麻籽油提取物组、FSSBO组。实验小鼠按分组灌胃给予受试物,连续14d。从小鼠体重、糖耐量、胰岛素水平等指标初步分析FSSBO的降血糖作用。
(2)基于课题组前期制备红花降脂软胶囊发现60%亚麻籽油提取物和40%红花籽油组成的比例综合降脂效果最好,应用高脂高糖乳灌胃联合腹腔小剂量多次注射STZ法实现Ⅱ型糖尿病小鼠模型的构建,分别给予剂量和配比不等的亚麻籽油提取物、红花籽油,探讨最佳配比。结果表明,60%亚麻籽油提取物和40%红花籽油复合可提高糖尿病小鼠胰岛β细胞分泌功能,改善胰岛素抵抗。
(3)基于60%亚麻籽油提取物和40%红花籽油复合(即FSSBO)具有良好的降血糖效果,再次探讨多不饱和脂肪酸对Ⅱ型糖尿病小鼠血糖的影响有无协同性,将FSSBO的降血糖作用与红花籽油、亚麻籽油、亚麻籽油提取物作比较,结果表明,FSSBO降血糖效果最佳,能使胰岛素分泌水平升高,增加胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)(P<0.05),改善胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)(P<0.01)((与模型组相比,HOMA-IR减少60.71%),提高机体对胰岛素的敏感性,从而改善Ⅱ型糖尿病小鼠糖脂代谢紊乱症状,达到降血糖效果。
(4)采用WesternBlot法检测大鼠肝脏中p-PI3K、p-Akt、p-GSK-3β蛋白的表达,初步明确FSSBO降血糖的作用机制。实验结果表明,与模型组相比,FSSBO组大鼠体重上升,但无统计学意义(P>0.05),空腹血糖及肝重指数明显降低(P<0.05或P<0.01),p-GSK-3β蛋白表达有效下调(P<0.05),p-PI3K以及p-Akt蛋白表达上调,但无统计学意义(P>0.05)。