海洋假单胞菌PF-6胞外多糖的制备与性质的研究

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微生物多糖具有植物多糖不具备的优良性质,它们生产周期短,不受季节、地域和病虫害条件限制,可通过发酵实现工业化生产,具有较强的市场竞争力和广阔的发展前景,是当前多糖的研究热点。海洋微生物胞外多糖因其独特的化学结构和生物活性研究在海洋生态学、微生物学特别是药学领域受到广泛关注。本文从海洋环境中筛选产糖的菌株,优化产糖培养基和发酵条件,分离纯化多糖,并研究了胞外多糖的性质,以期为今后胞外多糖更深入的研究提供科学依据。研究结果如下:1.筛选的菌株经生理生化分析,初步鉴定为假单胞菌属,命名为Pseudomonas PF-6。2.通过单因素试验和正交实验优化培养基组成和发酵条件。最佳培养基:蔗糖6.0%,酵母膏0.6%,氯化钠3.0%,氯化钙0.1%,磷酸氢二钾0.1%,氯化钾0.05%,硫酸亚铁0.05%,初始pH7.0左右;最佳发酵条件:250mL摇瓶装液量50mL,接种量4%,发酵温度28℃,转数160rpm。在此优化条件下假单胞菌PF-6的胞外多糖产量达到5.16g/L3.经乙醇沉淀、Sevage法脱蛋白、DEAE-52纤维素柱层析、透析、冷冻干燥等方法分离和纯化后得到纯多糖。紫外光谱表明多糖不含蛋白质和核酸,红外光谱分析表明多糖可能为一种由β-毗喃型糖组成的杂多糖。4.对多糖的物性:溶解性、吸油性、乳化性、起泡性、吸湿性和保湿性进行了研究。研究表明:多糖能溶于水,不溶于高浓度有机溶剂;多糖有较好吸油性,添加NaCl和蔗糖对其吸油性有所影响;多糖有一定的乳化性和起泡性,但性能低于黄原胶;在相对湿度为43%和81%的环境中,多糖的吸湿性能优于黄原胶和低聚糖,在相对湿度43%的环境中,多糖的保湿性优于低聚糖,而在硅胶环境中,多糖的保湿性与低聚糖相差不大。5.抗氧化活性试验表明:多糖有一定的还原力和清除DPPH的能力,尤其对·OH的清除能力较强甚至高于维生素C,对O1-·的清除能力也与维生素C相当,当清除率达50%时所需维生素C浓度分别为0.617mg/mL、0.147mg/mL,而在同等条件下所需多糖浓度分别为0.341mg/mL、0.149mg/mL。假单胞菌PF-6胞外多糖有潜力作为天然抗氧化剂应用于食品、药品和化妆品等工业中。
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