【摘 要】
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目的:通过实验研究PKM2在骨肉瘤MG-63细胞的相对表达量来研究肿瘤微环境中THP-1来源单核细胞在诱导分化成巨噬细胞后其表型可能会发生的变化。初步探讨骨肉瘤中PKM2和肿瘤相关巨噬细胞TAM之间的相关性。方法:1.通过siRNA干扰技术使骨肉瘤MG-63细胞的PKM2水平明显降低。2.应用qRT-PCR方法测定siRNA转染后的MG-63细胞中PKM2的表达情况。3.Transwell小室构建
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目的:通过实验研究PKM2在骨肉瘤MG-63细胞的相对表达量来研究肿瘤微环境中THP-1来源单核细胞在诱导分化成巨噬细胞后其表型可能会发生的变化。初步探讨骨肉瘤中PKM2和肿瘤相关巨噬细胞TAM之间的相关性。方法:1.通过siRNA干扰技术使骨肉瘤MG-63细胞的PKM2水平明显降低。2.应用qRT-PCR方法测定siRNA转染后的MG-63细胞中PKM2的表达情况。3.Transwell小室构建间接共培养模型,把低表达PKM2的骨肉瘤MG-63细胞与经过PMA诱导处理后的THP-1细胞共同组成体外间接共培养模型,模拟肿瘤微环境。4.共培养结束后用流式细胞技术测定单核巨噬细胞中CD209+细胞的比例,根据结果来初步分析巨噬细胞诱导后的分化表型。结果:1.为了研究肿瘤微环境中PKM2在骨肉瘤细胞中的表达情况,实验通过设计、合成并且转染siRNA,结果发现骨肉瘤MG-63细胞通过PKM2-siRNA均能使PKM2表达显著降低,与无效序列组以及正常培养组相比,实验组中PKM2表达量的改变显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。2.实验组经过PMA处理后与低表达PKM2的骨肉瘤MG-63共培养的THP-1细胞,经过流式检测结果显示CD209+细胞数量下降(与无效序列组和正常培养组相比,P<0.05)。结论:骨肉瘤中PKM2表达水平降低使单核细胞分化为M2型巨噬细胞的数量减少。
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