细菌内毒素(LPS)能激活包括外周血单核细胞在内的各种细胞,诱导细胞分化成熟或产生各种活性物质,如TNFs,IFNs,ILs和CSFs等.而细胞因子的调控呈网络化.近来的实验显示从表达标签文库(EST)来源的肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)在体外能特异性地诱导突变细胞凋亡,并可能在淋巴细胞分化及其在血液细胞的生成与调控中起重要作用.由于TRAIL的研究工作还刚刚起步,对其的作用机制和确切的功能并不完全清楚.为进一步研究TRAIL的生物学功能及其作用机制,研究人员选择人外周血单核细胞(PBMC)作为人TRAIL基因的来源,抽提细胞在LPS刺激下的总RNA,通过RT-PCR扩增人TRAIL基因的编码序列,片段大小与理论值一致;再行套式PCR扩增编码人TRAIL可溶性片段的序列,产物经TRAIL基因编码序列中有单酶切位点的限制性内切酶Taq Ⅰ酶切鉴定,结果完全被酶切且酶切片段与理论值一致,初步确证扩增出了编码TRAIL可溶性部分的基因;此编码可溶性分子片段的基因插入商品化测序表达一体化载体pProEX HTb,进行序列分析,结果发现与从国外EST库得到的基因序列有一个碱基不同,推断的编码氨基酸也有一个不同,但此位点并不在TNF超家族分子的最保守区域内.用抗人TRAIL多抗克隆抗体行Western-blotting也证实了细胞只有在受到刺激后才被诱导表达TRAIL.同时,该实验还观察了细胞因子间的相互调控.该研究初步揭示了体外人外周血单核细胞表达TRAIL的调控关系,并从人体细胞中扩增出了TRAIL基因,进行了重组表达研究,从而为进一步研究TRAIL的体内外作用及其机理打下了基础.