猪萎缩性鼻炎D型产毒巴氏杆菌的分离鉴定及其单克隆抗体的制备与初步鉴定

来源 :广西大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jicck321
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
猪传染性萎缩性鼻炎(PAR)主要由D型产毒素多杀性巴氏杆菌(D型DNT+Pm)引起的一种以隐性感染居多的慢性疾病,是猪的重要传染病之一。随着集约化程度不断提高和市场流通环节日益复杂化,该病对养猪业的危害已日趋严重。净化该病的关键是建立起能够对隐性感染猪确诊且快速的检测方法。本研究从我区5个规模化猪场采集了266份断奶仔猪的鼻拭子,用常规的细菌分离方法与生化鉴定得到80株多杀巴性氏杆菌,并通过豚鼠皮肤坏死试检,小鼠致死试验及PCR检测确定80株中有9株为产毒素多杀性巴氏杆菌,亦即为猪萎缩性鼻炎的病原菌,其中8株为D型DNT+Pm,1株为A型DNT+Pm。药敏试验表明,80株细菌对链霉素、阿莫西林、青霉素、克林霉素等表现出高耐药性,对阿米卡星、氨苄西林、卡那霉素、妥布霉素、庆大霉素、环丙沙星、强力霉素、复方新诺明均为中度敏感。用分离鉴定的D型DNT~+Pm,免疫Balb/c小鼠,通过杂交瘤细胞融合、克隆化及间接ELISA法筛选制备并鉴定获得六株能稳定分泌抗D型DNT+Pm菌株的MCAb细胞系,分别命名为1B11、1H7、5A5、5B4、6C10和6C11。对1B11、1H7和5A53腹水效价检测,结果分别为1:25600、1:6400和1:3200。特异性检测表明,1H7,5A5,1B11只与D型DNT+Pm出现阳性反应,与其他细菌没有交叉反应,6C11与A型Pm有交叉反应,6C10与WGX3和大肠杆菌发生交叉反应,5B4则与WGX1、WGX2、WGX3、WGX5、大肠杆菌,沙门氏菌发生交叉反应。1H7,5A5和1B11结合位点分析表明,1H7与1B11在抗原的结合位点相距较远,有望制作诊断PAR的试剂盒。为用McAb建立起抗原捕获ELISA检测抗原,抗体捕获ELISA检测抗体两种特异、敏感、快速简便易行的诊断方法打下基础。
其他文献
共轭亚油酸(Conjugated Linoleic Acid)是一种新型功能性油脂,具有多种生理功能。本研究在黄羽肉鸡日粮中添加共轭亚油酸,研究共轭亚油酸对黄羽肉鸡生长性能、屠宰性能、肉质、免疫指标、血脂水平以及脂肪细胞大小的影响,探索共轭亚油酸对脂肪沉积的影响及其机理。选用1日龄黄羽肉鸡90只,公母各半,随机分成三组,每组30只,设3个重复。对照组在日粮中添加3%菜籽油;试验Ⅰ组在日粮中添加1%
2003年H5N1亚型高致病性禽流感再度流行以来,全球养禽业多次爆发禽流感疫情;同时发生378人感染,238人死亡的病例(2008年4月3日,WHO)。H5N1亚型禽流感在世界范围内持续流行,不
期刊
猪链球菌是新生的重要的人畜共患病原菌,感染人类和猪后会出现败血症、关节炎、心内膜炎和脑膜炎等症状。至今为止,据有文献记录报道,猪链球菌已造成全球20多个国家超过1584
有风时白杨萧萧着,  无风时白杨萧萧着,  萧萧外更听不到什么。  野花悄悄的发了,  野花悄悄的謝了,  悄悄外园里更没什么。
期刊
本文以辛酰乙醛α-C衍生物甲基辛酰乙醛亚硫酸钠、乙基辛酰乙醛亚硫酸钠和丁基辛酰乙醛亚硫酸钠为受试对象,研究了它们对体外培养的小鼠巨噬细胞分泌酸性磷酸酶、溶菌酶和SOD的影响规律:建立了评价巨噬细胞吞噬功能的一种简单有效的体外吞噬法,并用这种方法研究了辛酰乙醛α-C衍生物对体外培养的小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力及变化规律。在辛酰乙醛的α位接入烷基后,其结构修饰物能在不同程度上提高巨噬细胞分泌酸性磷
本研究建立了鸡蛋中硝基苯气相色谱的检测方法,并运用该方法对松花江沿岸的主要鸡场和市场的鸡蛋进行了检测。同时,建立了血浆及蛋中硝基苯代谢物HPLC检测方法,并对硝基苯代谢物