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食管癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,发病率与死亡率均极高,严重威胁着人类的生命健康。由于食管癌早期通常难以发现,多数患者就诊时已属中晚期,化疗成为食管癌临床治疗的主要治疗方法之一。但是在化疗过程中出现的多药耐药(multiple drug resistance,MDR)现象是导致临床化疗失败的主要原因,研究表明,90%以上肿瘤患者的死因与MDR有关。因此,寻求有效的MDR逆转剂已成为当前的研究热点之一。姜黄素(curcumin,Cur)是从姜科植物的根茎中提取的一种植物多酚,具有较强的诱导肿瘤细胞凋亡和抑制肿瘤细胞扩散的作用。近年研究表明,姜黄素可以逆转肿瘤的MDR,但是姜黄素逆转MDR的作用机制目前仍不清楚。Notch1信号通路在肿瘤的发生发展及多种肿瘤化疗耐药形成中发挥重要作用。姜黄素能否通过阻断Notch1信号通路,提高化疗敏感性并逆转食管癌MDR尚未见报道。本实验以人食管癌耐长春新碱Eca-109/VCR细胞为研究对象,分为对照组、姜黄素组、长春新碱组、姜黄素+长春新碱组,检测姜黄素对Eca-109/VCR细胞耐药性的逆转作用、凋亡作用及Notch1、Jagged1、发状分裂相关增强子1(hairy and enhancer of split 1,Hes1)及P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达水平的调控,并探讨其可能的机制。通过MTT法检测不同浓度Cur对Eca-109/VCR细胞增殖的影响,以及Cur(25μmol/L)对Eca-109/VCR细胞耐药性的逆转作用;流式细胞术和Hoechst33258荧光染色检测对细胞凋亡的影响;实时荧光定量PCR法分析Eca-109/VCR细胞中Notch1、Jagged1和Hes1m RNA表达水平;蛋白质印迹法检测Eca-109/VCR细胞中Notch1、Jagged1、Hes1及P-gp蛋白表达的变化。结果发现,25μmol/L的Cur作用于Eca-109/VCR细胞24 h后,细胞的增殖抑制率为(8.82±0.80)%,Cur(25μmol/L)与不同浓度VCR联合作用后,VCR对Eca-109/VCR细胞的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)由VCR单药组的7.70μg/m L降为2.55μg/m L,Cur的逆转倍数为3.02;Cur(25μmol/L)、VCR(2μg/m L)单药及联合作用于Eca-109/VCR细胞24 h后,流式细胞术结果显示,细胞凋亡率为(16.36±2.05)%,明显高于Cur组的(5.48±0.84)%和VCR组的(7.11±1.09)%(P值均<0.05);Hoechst33258荧光染色从凋亡形态学及凋亡率上也与流式细胞术结果得出一致的结论;实时荧光定量PCR结果显示,Cur+VCR组与Cur组、VCR组相比,Notch1、Jagged1、Hes1 m RNA表达水平明显降低(P<0.01);蛋白质印迹法检测结果显示,与Cur组、VCR组相比,Cur+VCR组Notch1、Jagged1、Hes1及P-gp蛋白表达明显下调(P<0.05)。上述研究结果表明,Cur能明显增加Eca-109/VCR细胞对VCR的敏感性,逆转人食管癌耐药细胞Eca-109/VCR的耐药性,其机制可能是通过抑制Notch1信号通路,降低P-gp的表达及功能,促进凋亡而实现的。