纳米纤维增强双层组织引导膜力学及细胞响应研究

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牙周缺损中常常伴随着牙槽骨和牙周膜同时缺损的问题。常规采用的治疗方法是采用骨组织工程引导(guided bone regeneration,GBR)膜,由于成纤维细胞和上皮细胞生长速度较快,而成骨细胞生长速度较慢,在牙龈软组织与骨缺损区之间放置生物屏障膜,创造相对封闭环境,阻止软组织中成纤维细胞和上皮细胞长入缺损区,保证生长速度较慢的成骨细胞有足够时间生长进入缺损区,确保正常骨组织的生长和修复,但同时限制软组织对创区血供以及自身功能的修复。但目前组织工程引导膜存在两方面问题:一是力学性能不足,二是仅能引导骨组织再生,而缺乏牙周软组织的引导再生。本研究通过热致相分离技术,制备多孔纳米羟基磷灰石/聚酰胺(nano-hydroxyapatite/polyamide,n HA/PA)复合膜材料。nHA晶体结构与人体骨骼组织主要无机矿物成分相似,植入人体后nHA能与人体软骨组织发生键合作用且不会产生排斥作用,具有良好的生物相容性、生物活性和骨传导性,广泛应用于骨修复材料。利用静电纺丝技术,在纳米羟基磷灰石/聚酰胺(nHA/PA)多孔膜基底表面构造不同取向的PA纳米纤维,从而制备出纳米纤维增强双层组织引导膜。PA含有与胶原相似的酰胺基团(-CO-NH-),具有良好的细胞相容性和力学性能。两者综合了nHA生物活性高,PA力学强度高的优点,在骨修复临床中已成功应用。本研究通过扫描电镜(SEM)对滚筒不同转速下(0,500,1500 r/min)的nHA/PA多孔膜表面形成的PA纳米纤维的微观结构、取向情况进行观察;万能材料试验机对不同材料的力学性能进行测试;能谱仪(EDS)对nHA/PA复合膜的成分分布进行测试;利用仿生矿化技术研究nHA/PA复合材料与纳米PA纤维的矿化成骨能力;将双层组织引导膜材料与MG63细胞共培养,研究细胞在材料周围生长情况,并通过MTT技术定量研究了细胞的增殖情况,测试其生物相容性。研究结果表明:热致相分离法制备的nHA/PA膜表面及内部富多孔结构,纳米HA晶粒在PA基质中均匀分布。静电纺丝法在基底膜表面构建纳米纤维,随着转速增大,基底膜表面的纳米纤维取向性逐渐增加。力学测试结果表明,引入纳米纤维后,双层组织引导膜材料力学性能均有增强,500 r/min转速下,双层组织引导膜材料中,纳米纤维层与nHA/PA基底应变同时达到最大,拉伸强度达到39.86±4.73 MPa。矿化实验表明,矿化沉积物的量随矿化时间的增长而增加,在相同矿化时间下,nHA/PA复合膜的矿化能力优于PA纳米纤维。细胞实验显示,双层组织引导膜材料周围细胞生长良好,增殖明显,具有良好的细胞相容性,在牙周组织缺损再生领域有潜在临床应用。
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