论文部分内容阅读
吴茱萸为芸香科植物吴茱萸Euodia Rutaecarpa（Juss.）Benth.、石虎Euodia Rutaecarpa（Juss.）Benth var.officinalis（Dode）Huang或疏毛吴茱萸Euodia Rutaecarpa（Juss.）Benth.var.bodinieri（Dode）Huang的干燥近成熟果实[1-3]。吴茱萸次碱（Rutaecarpine,Rut）作为吴茱萸主要的药理活性成分之一,具有抗高血压、抗癌、抗炎、抗血栓形成、止痛等广泛的药理作用[2-4]。然而,Rut水溶性差,溶出慢,一定程度上限制其经皮渗透,导致经皮给药生物利用度低[2,3],故本论文将从两个方面着手提高吴茱萸次碱的经皮渗透和生物利用度:一、针对吴茱萸次碱在水中溶解性差、生物利用度低等问题,将吴茱萸次碱制备成立方液晶纳米粒（liquid cubic crystalline nanoparticles,LCNP）;二、基于物理促透-微针方式提高吴茱萸次碱LCNP的透皮效率。本论文主要从吴茱萸次碱LCNP制备、药剂学表征、微针力学模型、微针促透等方面进行研究,具体如下:1、吴茱萸次碱LCNP的制备。首先建立了吴茱萸次碱LCNP含量和包封率的测定方法,再采用前体注入联合高压均质法制备了吴茱萸次碱LCNP,考察搅拌温度、搅拌转速、搅拌时间、均质压力、均值时间等因素对吴茱萸次碱LCNP包封率和粒径的影响,确定了吴茱萸次碱LCNP最佳制备工艺参数,并对吴茱萸次碱LCNP处方工艺进行了考察,最后以吴茱萸次碱LCNP的粒径、PDI、包封率、载药量为评价指标,采用Box-Behnken效应面法优化处方工艺,得到了药物的包封率、载药量以及LCNP的粒径、PDI均较佳的Rut-LCNP。2、吴茱萸次碱LCNP的药剂学特性及释放行为研究。首先通过激光粒度仪、偏光显微镜、透射电镜等方法对吴茱萸次碱LCNP粒径、形貌、光学特性进行表征。再从吴茱萸次碱LCNP的pH、渗漏率、体外释放以及体外透皮性能等几个方面对吴茱萸次碱LCNP的释放行为进行考察。结果显示吴茱萸次碱LCNP的pH和渗漏率均较为稳定;比较两种体外介质的吴茱萸次碱LCNP的体外释放度,结果表明30%PEG400-30%乙醇-生理盐水作为体外介质,吴茱萸次碱LCNP的释放度具有显著差异,且吴茱萸次碱LCNP药物释放符合Higuchi方程。在体外经皮渗透实验方面,吴茱萸次碱LCNP经皮渗透符合零级动力学方程。3、空白聚合物微针辅助条件下吴茱萸次碱LCNP的体外经皮吸收研究。首先采用生物组织（小鼠腹部皮肤）来考察微针的穿刺性能,再采用组织学切片方法评价微针穿刺性能。通过组织学切片染色观察发现不同的力学模型的微针均能刺入皮肤的角质层,预处理的皮肤发生变形,形成了与微针形状相似的微孔通道。采用Franz扩散池进行空白聚合物微针对吴茱萸次碱LCNP促渗的体外经皮实验,本实验以稳态透皮速率J、12 h累积透皮量为促渗效率的考察指标,研究微针长度、微针对皮肤预处理的滞留时间、作用力对吴茱萸次碱LCNP促渗效率的影响。结果显示,与被动扩散对照组相比,微针预处理皮肤的力度和微针预处理皮肤的时间是影响药物经皮渗透行为的两个重要因素,微针长度对吴茱萸次碱LCNP的透皮吸收并无明显影响。在本文所涉及的微针预处理皮肤的作用压力中,三种作用压力下吴茱萸次碱LCNP的透皮速率分别为4.5979、5.1538、6.0726μg/（cm2·h）,其12 h单位面积渗透量分别为26.9685、31.3567、38.3634μg/cm2,且两两比较发现30 N的作用力微针组与20N、10N的作用力微针组均有显著差异（P<0.05）。微针预处理皮肤的滞留时间在310 min范围内,时间越长药物的渗透速率越大;三种作用时间下吴茱萸次碱LCNP的透皮速率为3.9786、4.5979、5.3258μg/（cm2·h）,其12 h单位面积渗透量分别为23.6996、26.9685、32.9847μg/cm2,两两比较后,结果表明滞留时间为10 min的微针组与3 min微针组之间也存在着显著性差异（P<0.05）。微针长度的差异对吴茱萸次碱LCNP的渗透量影响并无明显差异。4、不同美容微针辅助条件下吴茱萸次碱LCNP体外经皮吸收研究。首先采用生物组织（小鼠腹部皮肤）来考察美容微针真实的穿刺性能,再采用组织学切片方法评价美容微针穿刺性能。通过组织学切片染色观察发现纳米晶微针预处理后,小鼠腹部皮肤并无形变发生;金属美容微针预处理的皮肤发生变形,形成了与微针形状相似的微孔通道。采用Franz扩散池进行体外经皮实验,本实验以稳态透皮速率J、12 h累积透皮量为促渗效率的考察指标,研究不同材料的美容微针对吴茱萸次碱LCNP促渗效率的影响。实验结果表明,与被动扩散对照组相比,普通金属微针对吴茱萸次碱LCNP促渗效率有明显影响,而纳米晶微针对促渗效率并无明显影响。圆形、方形纳米晶微针预处理后,吴茱萸次碱LCNP的透皮速率分别为2.1503、2.0817μg/（cm2·h）,其12 h单位面积渗透量为11.6946、10.99507μg/cm2。普通金属微针的四种针数（42G、36G、12G、9G）之间,吴茱萸次碱LCNP的透皮速率分别为6.4643、7.0176、5.7948、6.0726μg/（cm2·h）,其12 h单位面积渗透量为66.4695、64.7244、63.4686、67.5607μg/cm2,但是微针的针数对吴茱萸次碱LCNP的J、透皮量并无明显差异。