论文部分内容阅读
[目的]以二价矿物质元素代谢、抗氧化活性、病理切片、凋亡相关基因表达量为观测点,探究葡萄籽原花青素对急性和慢性铁负荷大鼠肾脏组织损伤的营养干预作用,为预防铁负荷而引起的健康危害提供理论依据。[方法]试验分为两大组:急性铁负荷组(急性组)和慢性铁负荷组(慢性组)。分别选择体重(230±5)g和(65±5)g的清洁级雄性SD大鼠各40只,随机分为四组,每组10只,分别为对照组、铁负荷模型组、原花青素组和试验组。适应性饲养7d后,采用隔日100 mg· kg-1和每日2.5mg· kg-1的剂量进行腹腔注射右旋糖酐铁分别构建急性与慢性铁负荷大鼠模型,试验组也分别采用隔日100mg· kg-1和每日2.5 mg· kg-1的剂量进行腹腔注射右旋糖酐铁,葡萄籽原花青素则分别每日以100mg.kg-1和25 mg·kg-1的剂量进行灌胃,对照组给予0.9%的生理盐水,急性试验饲喂10 d,慢性试验饲喂7周,记录体重变化。采集大鼠血液与肾脏组织。用ICP-MS测定肾脏组织中矿物质元素Fe、Ca、Zn、Mg含量;判定铁负荷模型是否建立成功以肾脏组织中Fe含量和血液中的红细胞数目(RBC)、血红蛋白(HGB)和血清总铁结合力(TIBC)为根据;试剂盒检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、总抗氧化力(T-AOC)活性、肌酐(CR)和尿素氮(BUN);HE染色肾脏切片;以RT-PCR法检测肾脏组织中Fas与Bax凋亡基因的表达量。[结果](1)与对照组比较,铁负荷后铁、钙升高(P<0.05或P<0.01),锌极降低(P<0.01),慢性镁升高(P<0.05);给予原花青素干预后锌降低(P<0.05或P<0.01),急性铁升高(P<0.05);慢性原花青素组的锌、钙、镁升高(p<0.05或P<0.01)。与模型组比较,给予原花青素干预后钙、镁降低(P<0.05或P<0.01),慢性铁降低(P<0.01);单独给予原花青素组的铁降低(P<0.01),锌极升高(P<0.01),急性钙降低(P<0.01)。(2)与对照组比较,模型组血液中的RBC、HGB、MDA、CR、BUN升高,TIBC、GSH-PX、SOD降低(P<0.05或P<0.01),急性T-AOC降低(P<0.05);给予原花青素干预后RBC、HGB升高,GSH-PX降低(P<0.05或P<0.01),急性TIBC降低(P<0.01);原花青素组在急性组中HGB降低(P<0.01),T-AOC升高(P<0.01),慢性SOD升高(P<0.01)。与模型组比较,给予原花青素干预后RBC、HGB、MDA、CR、BUN降低,TIBC、SOD升高(P<0.05或P<0.01),慢性GSH-PX升高(P<0.01);原花青素组的RBC、HGB、MDA、CR、BUN 降低,TIBC、GSH-PX、SOD、T-AOC 升高(P<0.05或 P<0.01)。(3)与对照组比较,铁负荷后肾脏组织中的GSH-PX降低,MDA升高(P<0.05或P<0.01),急性SOD降低(P<0.05),慢性T-AOC降低(P<0.05);慢性给予原花青素干预后GSH-PX、SOD、T-AOC升高(P<0.01);原花青素组的T-AOC升高(P<0.01),慢性GSH-PX升高(P<0.01)。与模型组比较,给予原花青素干预后GSH-PX、SOD、T-AOC升高,MDA降低(P<0.05或P<0.01);原花青素组的GSH-PX、T-AOC升高,MDA 降低(P<0.05或P<0.01)。(4)与对照组比较,单独给予原花青素组与原花青素干预后肾脏组织的形态学未发生改变。急性模型组中没有明显的形态学改变,慢性模型组的大鼠肾脏组织HE染色图中显示局部间质炎细胞浸润,纤维组织增生。(5)与对照组比较,铁负荷后肾脏组织中的FasmRNA升高(P<0.05或P<0.01),慢性组中BaxmRNA降低(P<0.01);给予原花青素干预后慢性组FasmRNA的表达量升高(P<0.05),BaxmRNA降低(P<0.01);单独给予原花青素后BaxmRNA降低(P<0.01),急性组中Fas mRNA降低(P<0.0.05)。与模型组比较,给予原花青素干预后FasmRNA、BaxmRNA 降低(P<0.05 或P<0.01);原花青素组的 Fas、BaxmRNA 的降低(P<0.01)。[结论]原花青素能够对铁负荷引起的大鼠肾脏组织中矿物质元素代谢失调、氧化损伤及肾脏细胞凋亡起到保护作用。