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研究目的:探讨毛葡萄提取物的抗血栓形成作用及其机制,为进一步评估和研发毛葡萄的抗血栓作用提供实验依据。实验方法:(1)动-静脉旁路血栓形成模型:实验随机分为①对照组(control):蒸馏水灌胃;②毛葡萄大剂量组(VRE-LD):毛葡萄提取液(含生药4g/kg)灌胃;③毛葡萄中剂量组(VRE-MD):毛葡萄提取液(含生药2g/kg)灌胃;④毛葡萄小剂量组(VRE-SD):毛葡萄提取液(含生1g/kg)灌胃;⑤丹参组(CDDP):CDDP溶液(67.5mg/kg)灌胃;每天一次连续灌胃10天。末次给药后30min以4%水合氯醛(1ml/100g)麻醉动物,分离右侧的颈总动脉和左侧的颈外静脉。颈外静脉先结扎静脉远心端,剪开一个小口,将事先准备好塑料管(管中放置一根6cm的4号线,并将50U/ml肝素生理盐水溶液充满聚乙烯管腔)向近心端插入并结扎固定。右侧颈总动脉先用血管夹夹住近心端,剪开一个小口,将管向近心端插入并结扎固定。然后放开血管夹,计时15min后将线取出称取重量,HE染色观察血栓形态学改变。从腹主动脉取血3ml, 3000 rpm/min 4℃离心15min,取上清血浆用放射免疫法检测TXB2和6-keto-PGF1α的含量。(2) FeCl3诱导血栓形成模型:实验随机分为①假手术组(sham):蒸馏水灌胃;②对照组(control):蒸馏水灌胃;③毛葡萄大剂量组(VRE-LD):毛葡萄提取液(含生药4g/kg)灌胃;④毛葡萄中剂量组(VRE-MD):毛葡萄提取液(含生药2g/kg)灌胃;⑤毛葡萄小剂量组(VRE-SD):毛葡萄提取液(含生1g/kg)灌胃;⑥丹参组(CDDP):CDDP溶液(67.5mg/kg)灌胃;每天一次连续灌胃10天。末次给药后15min以4%水合氯醛麻醉动物,分离两侧颈总动脉,右侧颈总动脉备采血用,左侧颈总动脉分离长度为1.5cm,其下置一小片塑料薄膜(4cm×1.2cm),2～5组在颈总动脉上放置一吸有10μl FeCl3溶液的小滤纸片(1cm×0.6cm),作用20min后去掉滤纸片,纸片去除后90min从右颈总动脉取血, 3000rpm/min 4℃离心15min,取上清血浆用放射免疫法检测TXB2、6-keto-PGF1α和ET-1的含量。取有血栓段的血管称其重量,HE染色观察血栓形态学改变。(3)急性血淤模型:实验随机分为①正常组(normal):蒸馏水灌胃;②对照组(control):蒸馏水灌胃;③毛葡萄中剂量组(VRE-MD):毛葡萄提取液(含生2g/kg)灌胃;④丹参组(CDDP):CDDP溶液(67.5mg/kg)灌胃;每天一次连续灌胃10天;末次给药后1 h,除正常组外,其余各组皮下注射1mg/ml肾上腺素0.08ml/100g,2 h后将大鼠浸入冰水中5min进行冷刺激,间隔2 h后再注射等量肾上腺素。大鼠禁食不禁水,次日腹主动脉抽5ml,EDTA-Na2抗凝。用TYXN-96多功能智能血液凝聚仪测定全血粘度。结果:(1)对动-静脉旁路血栓形成模型的影响:与对照组相比,毛葡萄各剂量组可明显抑制血栓形成,降低形成血栓的重量(P<0.05),其中毛葡萄中剂量组效果最好,也好于丹参组;毛葡萄各剂量组能明显降低血浆TXB2、TXB2/6-keto-PGF1α和升高6-keto-PGF1α水平,其中也是毛葡萄中剂量组效果最好。(2)对FeCl3诱导血栓形成模型的影响:毛葡萄各剂量组血管腔血栓量明显小于对照组,其中以中剂量组最为显著。丹参组与对照组对比,形成的血栓稍有减小,但与毛葡萄组比较,其血栓明显大于毛葡萄组;毛葡萄各剂量组能明显降低血浆TXB2、ET-1和升高6-keto-PGF1α水平,其中也是毛葡萄中剂量组效果最好。(3)对血粘度的影响:与对照组相比,毛葡萄组能明显降低全血粘度(P<0.05),并毛葡萄组的效果好于丹参组。结论:1.在大鼠体外动-静脉旁路模型和FeCl3诱导血栓形成模型上证实毛葡萄提取物具有抗血栓形成作用。并其抗血栓效果好于丹参。2.通过检测血浆TXB2、6-keto-PGF1α、ET-1和血粘度的变化,发现毛葡萄提取物有降低血浆TXB2和ET-1和升高6-keto-PGF1α水平,以及降低血粘度的作用,这途径可能是毛葡萄抗血栓形成作用的主要机制。