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口腔扁平苔藓(oral lichen planus，OLP)是一种发病机制不明的口腔黏膜病，具有癌变倾向，WHO将其定义为癌前状态，目前临床上还没有一种特效的治疗药物及方法。化湿行瘀清热方剂为许彦枝教授根据祖国传统医学理论和多年临床经验研制的治疗OLP的经验方，经过近几年的临床初步观察显示出良好的临床效果。但化湿行瘀清热方剂的确切作用机制是什么？仍需要深入研究。在我们前期研究工作中应用基因芯片技术筛选出有关OLP的142个差异表达基因及其8条相关通路，其中NF-κB通路与OLP密切相关。近年来发现，Notch信号通路与一些人类肿瘤的发生发展密切相关，许多研究证实，NF-κB与Notch转导通路之间存在复杂的交联对话作用，Notch/NF-κB信号通路在OLP发生、发展过程中的作用是什么？迄今尚未见报道。为此，本研究应用免疫组织化学技术，检测了NF-κB、Notch-1及Jagged-1蛋白在口腔病变组织中的表达，探讨了Notch-1/NF-κB信号传导系统在OLP发生、发展过程中可能的作用机制；采用酶联免疫法检测了NF-κB相关细胞因子IL-6、VEGF、sICAM-1在OLP患者血清、唾液中的表达，并通过观察OLP患者用药前后的临床病损变化及化湿行瘀清热方剂对OLP患者IL-6、VEGF、sICAM-1的调节作用，探讨了中药化湿行瘀清热方剂对OLP患者的影响及作用机制，为指导临床用药奠定基础。第一部分NF-κB、Notch-1、Jagged-1在口腔扁平苔藓中的表达及临床意义目的：研究NF-κB、Notch-1及Jagged-1在人口腔鳞状细胞癌、口腔扁平苔藓和正常口腔黏膜组织中的表达，并分析这三种蛋白间的相关性，探讨Notch-1/NF-κB信号传导系统在口腔扁平苔藓发生、发展过程中的作用。方法：应用免疫组织化学方法检测NF-κB、Notch-1及Jagged-1在45例口腔鳞状细胞癌、52例口腔扁平苔藓和30例正常口腔黏膜组织标本中的表达情况，分析染色强度在这三种组织中的表达差异及三种蛋白表达的相关性。结果：1免疫组化结果显示所检测的NF-κB蛋白在各组口腔黏膜组织中均有表达，表现为细胞浆黄染。NF-κB在口腔扁平苔藓及口腔鳞状细胞癌组中的表达明显高于正常口腔黏膜组(Z=-7.709，P=0.000和Z=-6.605，P=0.000)，其在口腔扁平苔藓组中的表达稍低于口腔鳞状细胞癌组（Z=-2.028，P=0.022）。2结果显示Notch-1蛋白在各组口腔黏膜组织中均有表达，表现为细胞浆和细胞核黄染。Notch-1在口腔扁平苔藓及口腔鳞状细胞癌组中的表达明显高于正常口腔黏膜组(Z=-6.528，P=0.000和Z=-6.289，P=0.000），其在口腔扁平苔藓组中的表达稍低于口腔鳞状细胞癌组（Z=-2.027，P=0.021）。3Jagged-1蛋白在各组口腔黏膜组织中均有表达，表现为细胞浆及细胞膜黄染。Jagged-1在口腔扁平苔藓及口腔鳞状细胞癌组中的表达明显高于正常口腔黏膜组(Z=-6.630，P=0.000和Z=-6.689，P=0.000），其在口腔扁平苔藓组中的表达稍低于口腔鳞状细胞癌组（Z=-2.646，P=0.004）。4在口腔扁平苔藓组中NF-κB与Notch-1的表达明显相关(r=0.333，P=0.016)，与Jagged-1的表达明显相关(r=0.284，P=0.041），Notch-1与Jagged-1的表达具有显著相关性（r=0.440，P=0.001）；在口腔鳞状细胞癌组中NF-κB与Notch-1的表达明显相关（r=0.695，P=0.000），与Jagged-1的表达明显相关（r=0.330，P=0.027），Notch-1与Jagged-1的表达明显相关（r=0.443，P=0.002）。结论：1NF-κB、Notch-1及Jagged-1在口腔扁平苔藓组及口腔鳞状细胞癌组中的表达明显高于正常口腔黏膜组，具有显著差异。2在口腔扁平苔藓组和口腔鳞状细胞癌组中NF-κB、 Notch-1、Jagged-1三种蛋白之间具有显著相关性，提示Notch-1/NF-κB信号通路的异常激活可能与口腔扁平苔藓的发生发展有关。第二部分化湿行瘀清热方剂对口腔扁平苔藓Notch/NF-κB信号通路相关细胞因子的影响目的：建立化湿行瘀清热方剂中薄层色谱(Thin-layer chromatography，TLC)鉴别方法，控制制剂质量，并探讨其对口腔扁平苔藓（OLP）的影响及作用机制。方法：采用TLC对化湿行瘀清热方剂中的黄柏和赤芍进行定性鉴别，采用酶联免疫吸附试验法检测30例口腔扁平苔藓患者治疗前后血清及唾液中白介素6（IL-6）、血管内皮生长因子（VEGF）、可溶性细胞间粘附分子1（sICAM-1）水平的变化，并观察评定其临床疗效。结果：薄层色谱鉴别可检出样品中各相应的薄层斑点。患者经过8周的治疗后，显效18例，有效10例，无效2例，总有效率为93.3℅，血清及唾液中IL-6、VEGF、sICAM-1水平较治疗前明显降低，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：1薄层色谱法简便，准确，专属性强，可用于中药方剂的质量控制。2化湿行瘀清热方剂治疗口腔扁平苔藓有明显的临床效果。3经化湿行瘀清热方剂干预后与Notch-1/NF-κB信号通路有关的细胞因子明显降低，提示化湿行瘀清热方剂可能是通过调节Notch-1/NF-κB信号通路起到治疗OLP作用。