为探索大规模工业生产适用的虾青素提取方法,本实验主要探究了对同一种新鲜的雨生红球藻进行不同干燥方法的处理。经过干燥处理后制成不同的干藻粉,以和未处理的新鲜藻膏,用有机溶剂浸提法对所得干藻粉和新鲜藻膏分别进行虾青素的提取,对虾青素的提取率进行比较。在本实验的条件下,结果显示,干燥后的雨生红球藻提取率均比新鲜藻膏的高,虾青素的提取率从高到低依次为,冷冻干燥法>低温干燥法>喷雾干燥法>鼓风干燥法>自然晾干法>新鲜藻膏。干燥后的红球藻比新鲜藻膏提取率高,更适用于工业化生产。探究利用油溶法从雨生红球藻中提取虾青素的方法改进,油溶法主要是采用食用油作溶剂来提取虾青素,但食用油单独提取时,提取率比较低,因此,实验采用向食用油中分别添加少量丙酮和乙醇,并与丙酮和食用油进行比对,最终结果表明,提取率最高的是丙酮+食用油,约是植物油的2倍,且高于丙酮的提取率,提取效果明显。该实验探究了用不同配比的有机溶剂浸提法提取雨生红球藻中虾青素,在乙醇和丙酮的不同比例下(1:0,1:1,1:2,2:1,0:1,v/v),对提取得到的虾青素含量进行比较,用分光度计法检测OD值,计算出虾青素的含量。结果表明乙醇/丙酮为1:2(v/v)时,提取率最高。目的在于检验之前所讨论的乙醇、丙酮不同配比中,当丙酮/乙醇为2:1(v/v)时,提取效果最好。因此,该实验将其与其他有机溶剂进行比较,结果显示丙酮/乙醇2:1的提取率为17.908mg/g,提取效果最佳。为获得旋蒸法的最佳优化条件,实验通过改变提取剂种类氯仿、氯仿/乙醇1:1(v/v)、氯仿/乙醇2:1(v/v)、氯仿/乙醇1:2(v/v)、乙醇5种有机溶剂,设置温度梯度为30℃、33℃、36℃、39℃、42℃,压强梯度为-0.01Pa、-0.02Pa、-0.03Pa、-0.04 Pa、-0.05 Pa,转速梯度为50r/min、70r/min、90r/min、110r/min、130r/min。四个因素五水平上设计正交试验,进行探讨。最后得到,当提取剂为氯仿/乙醇1:1(v/v),42℃,-0.01Pa,转速为70r/min,时的提取率最高,为16.942mg/g,该条件下提取效果最佳,较氯仿和乙醇的提取效率明显提高。探究常用的破壁方法中提取效率较高,并适用于大规模生产的方法。每种方法采用不同的提取剂来进行实验设计,每组实验中丙酮/乙醇为2:1(v/v)和氯仿/乙醇1:1(v/v)的提取率较高,高压均质法的提取效果最好,超声波法的机械破壁法的效果最低,提取率从高到低依次为高压均质法>研磨法>玻璃珠法>酶法>超声波法。为检验虾青素对肿瘤细胞生长的抑制作用,设计体外实验,对B16F10黑色素瘤细胞进行培养,设置两组虾青素的浓度梯度A组、B组,各5个浓度梯度,分别为10-50μg/mL成等差数列、0.001-10mg/mL成等比数列,每个浓度设有6个重复,并用MTT法,最后通过酶标仪在λ为560nm处检测其OD值。用excell表格进行t检验,得到P值并分析对照组与实验组的作用差异是否显著,同时计算虾青素对黑色素瘤的抑癌率,结果显示A组中的5个浓梯度用t检验来分析后,浓度为1mg/mL时,单尾P(T<=t)为0.05,则认为该浓度下的虾青素粗提物与对照组相比,差异显著,对B16F10黑色素瘤细胞的生长抑制作用明显;浓度为10mg/mL时,与对照组比较,差异极显著,对B16F10黑色素瘤细胞的生长抑制作用非常明显,证明虾青素的抗癌作用明显。