桑叶是一味传统中药,又名铁扇子,是桑科植物桑的干燥叶,具有疏散风热、明目清肝、降血压、降血脂、降血糖、抗氧化、清除自由基等功效。桑叶中含有丰富的多糖类,生物碱类、黄酮类化合物、氨基酸、香豆素、挥发油类等有效成分。本文以桑叶中具有显著药用活性组分----黄酮类化合物作为研究对象,研究了桑叶黄酮的最佳提取条件,用高速逆流色谱分离桑叶提取液中黄酮类化合物以及产物结构鉴定。对桑叶中药用活性组分黄酮类化合物进行提取实验,采用乙醇浸提法和超声提取法两种方法进行单因素变量实验对比分析。确定乙醇浸提法和超声提取法的最佳工艺条件,比较两种提取方法发现超声提取在提取时间和最后提取率上都是优于乙醇提取法。超声提取最佳工艺条件为:乙醇质量百分数60%,液固比为50:1(mL/g),超声时间20min,温度60℃,超声功率325W,提取率6.13%。首次采用高速逆流色谱法对桑叶提取液中药用活性组分黄酮类化合物进行分离提纯,同时从理论上分析黄酮类化合物分子结构和溶剂体系极性参数对固定相保留率及产品纯度的影响。通过比较不同溶剂体系和流动相流速对固定相保留率的影响,确定高速逆流色谱最佳分离条件是在工作转速为800rpm,固定相工作流速30mL/min,流动相工作流速5mL/min,检测波长257nm条件下选用V(乙酸乙酯):V(正丁醇):V(水)=4:1:5作为最佳溶剂体系。最后得到的分离产物浓缩后经高效液相色谱检测,检测条件:流动相为V(色谱甲醇):V(0.5%磷酸水溶液)=50:50等梯度洗脱,流速1mL/min,柱温30℃,检测波长257nm,进样量30μL。检测到纯化液中黄酮含量达到93.8%,RSD值为1.8%(n=4)。研究结果较大地提高了桑叶黄酮产物的纯度,对桑叶提取液中有效活性组分的分离精制研究提供了基础。