疟疾是一类严重威胁人类健康的疾病，每年约有3⁵亿人感染，并可导致66万人死亡，其对撒哈拉以南的非洲地区的危害尤为严重。该病主要影响初次感染个体，尤其是对5岁以下儿童和初次/二次怀孕妇女影响较大。由于疟原虫具有复杂的生活史和频繁的基因变异，因此疟疾疫苗的发展十分缓慢。有报道称，抗原变异特征是影响疟疾致病性的重要因素，表达在红细胞表面的恶性疟原虫红细胞膜蛋白1（Plasmodium falciparum erythrocyte membrane protein1，PfEMP1）具有调节抗原变异和细胞粘附的作用，该蛋白质家族位于受染红细胞表面、抗原性质复杂多变。PfEMP1家族由59个var基因编码组成，包括56个var基因和3个小的var-like基因（统称为var3基因）。根据基因上游序列的同源性及其在基因组中的位置，将var基因分为UpsA，UpsB，UpsC，UpsD和UpsE五个亚类。其中var3基因属于UpsA，但其在基因长度及编码蛋白质的二级结构方面，与UpsA中其它成员差异很大。三个var-like基因PF3D7₀100300、PF3D7₀600400和PF3D7₀937600分别位于第1，6，9条染色体上，基因长度在4kb左右，编码的PfEMP1只包含两个DBL区，而其它var基因编码的PfEMP1包含多个DBL（Duffy样结合结构域）和CIDR区（半胱氨酸富含区），因此var3基因编码的“mini-PfEMP1”表现出非典型的PfEMP1结构。此外几乎能够从所有的恶性疟原虫分离株中检测到var3基因（除了虫株HB3和IGH），同妊娠相关性疟疾相关的var2csa基因一样，非常保守。但是这三个基因编码的蛋白质的功能仍是未知的。本实验以三个var-like基因作为研究对象，通过荧光定量PCR（QPCR），Western-blot和间接免疫荧光的方法分析三个基因的转录及表达情况，为阐述该基因在疟原虫及疟疾疾病中发挥的重要作用奠定基础。本研究首先以seryl-tRNA synthetase为内参基因，通过荧光定量PCR技术分析了三个var-like基因在恶性疟原虫发育繁殖过程中的转录水平，并与其它var基因的转录情况进行比较。结果显示，三个var-like基因PF3D7₀937600、PF3D7₀600400和PF3D7₀100300在恶性疟原虫侵入红细胞后都开始有转录，其转录趋势与其它var基因相似，但在红内期16h转录水平达到高峰后很快降低，这一特点与其它var基因的转录模式又存在差别。然后，利用亲和层析的方法纯化获得了三个var-like基因的重组蛋白质，并免疫大鼠制备抗血清和特异性IgG抗体，通过Western-blot和间接免疫荧光的方法分析了三个蛋白质的时空表达特征。通过Western-blot的方法确定了三个var-like基因在恶性疟原虫发育繁殖不同时期的表达情况。按照实验室标准方法培养3D7株恶性疟原虫，利用Percoll梯度离心法纯化环状期，滋养体期和裂殖体期的染虫红细胞，分别以anti-ATS，anti-PF3D7₀937600， anti-PF3D7₀100300， anti-PF3D7₀600400IgG作为一抗验证虫体蛋白质的表达情况。结果显示，基因PF3D7₀600400编码的蛋白质在滋养体期和裂殖体期表达；基因PF3D7₀937600编码的蛋白质只在滋养体期表达；基因PF3D7₀100300编码的蛋白质只在裂殖体期表达。另一方面，利用间接免疫荧光的方法对三个蛋白质的表达部位进行了分析，实验结果显示，在恶性疟原虫染虫红细胞膜周围有绿色点状荧光分布，这一现象和其它的PfEMP1的表达位置类似，因此我们推测三个蛋白质分布在恶性疟原虫染虫红细胞表面。