非生物胁迫(如干旱、盐渍、低温等)使植物缺水受到伤害，严重时甚至导致植物体死亡，给作物生产带来相当严重的质量和产量的下降。为提高作物对环境胁迫的抗性，利用基因工程技术培育抗逆植物新品种已成为21世纪农业发展的一个重要方向。 存在于转基因植株中的选择标记基因具有潜在的危害性。主要体现在对环境和人类健康的安全性方面，由此影响了消费者对转基因产品的接受程度，也不利于对同一个品种进行多次转基因操作，同时还严重阻碍了转基因产品的商品化进程。为彻底消除选择标记基因的负面影响，目前已经发展了多种去除选择标记基因的植物转化系统，如共转化系统、位点特异性重组系统、转座子系统及MAT载体系统等。其中共转化系统中的双T-DNA载体系统是去除转基因植物中选择标记基因的一种简单有效的方法。 本研究分别以逆境相关转录因子DREB基因和超氧化物歧化酶SOD基因为目的基因，构建双T-DNA植物表达载体pCDMARpWDT-Hyg和pCDMARUSOD-Hyg，载体中选择标记基因hpt和目的基因分别构建在两个分离的T-DNA结构域中，目的基因两侧还包含有可提高基因表达水平的豌豆MAR序列。载体pCDMARpWDT-Hyg中用来源于小麦的一胁迫诱导启动子去驱动抗逆转录因子DREB基因的表达。以根癌农杆菌介导法分别对玉米和水稻胚性愈伤组织进行遗传转化，在含HygB的筛选培养基上连续筛选3轮，每轮筛选3周，再经分化、再生过程获得了转基因植株。对转基因玉米植株进行PCR分析，结果表明，用双T-DNA载体获得的转DREB基因玉米中，外源基因和选择标记基因的共转化频率为23.8％。下一步工作是在转基因后代中通过有性繁殖过程筛选基因分离的植株，从而得到无选择标记基因的转基因植株。 转化效率低仍然是制约植物基因工程发展的一个重要因素。本研究利用β-葡萄糖苷酶(GUS)基因的瞬时表达对农杆菌转化玉米的条件进行了探索性实验，期望优化农杆菌介导的玉米遗传转化体系，提高外源基因的转化效率。分别从愈伤高渗处理、不同pH值的愈伤侵染液及侵染愈伤中加入双子叶植物敏感组织这三个方面研究了基因转化效率的影响因素。统计学分析结果表明，低pH值侵染液对提高转化效率的效果最为明显，其中pH5.2的侵染液对提高转化效率具有最佳效果；愈伤中加入油菜剪碎叶片进行侵染和共培养后转化效率也有明显提高；另外，共培养基中含甘露醇10g／L的高渗处理对提高转化效率也有一定效果。