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目前,癌症已经是危害人类生命健康的首要疾病。近年来,全世界癌症发病每年超过1000万人,每年死亡约700万人。鉴于此,有效抗癌药物的研究刻不容缓。FeSOD-ScFv(Superoxide dismutase-single chain variable fragment)是一种双功能蛋白,能靶向性作用于肺腺癌细胞,然而FeSOD-ScFv通过胞吞作用进入细胞后,大部分被溶酶体消化,只有少部分发挥作用,这就减弱了FeSOD的抗肿瘤效果。研究表明,视黄酸(Retinoic acid,RA)通过改变内吞小泡的胞内途径,降低内吞小泡被溶酶体消化的概率,增强某些药物的药效。本论文通过定点突变技术将本实验室保存的已突变的FeSOD-ScFv质粒回复突变,然后重新构建表达载体pET-28a-FeSOD-ScFv,转化到大肠杆菌BL21中。构建好的工程菌经正交试验得到最佳表达条件为:37℃、0.5 mmol/L IPTG浓度下诱导表达7小时;SDS-PAGE分析表明目的蛋白以包涵体形式表达,表达的目的蛋白占全菌蛋白总量的53%。包涵体经提取、纯化,通过尿素线性梯度透析复性后,蛋白的比活约为620U/mg,回收率为84.3%。将复性后的FeSOD-ScFv与视黄酸单独及联合作用肺腺癌细胞A549,结果表明FeSOD-ScFv在体外具有显著的抗肿瘤作用,且视黄酸显著提高FeSOD-ScFv对肺腺癌细胞A549的抑制作用,抑制效果提高87%。本研究回复突变fesod-ScFv基因,成功构建pET-28a-FeSOD-ScFv工程菌,在大肠杆菌中高效表达了FeSOD-ScFv双功能蛋白,表达的目的蛋白在体外对肺腺癌细胞A549有抑制效果,视黄酸能够增强这一抑制效果,这为FeSOD-ScFv临床应用于治疗肿瘤提供理论基础,具有重要的社会和经济效益。