论文部分内容阅读
本研究以熟性、耐热性、抗病性和抽薹性等重要农艺性状有明显差异的大白菜品种汴早-26和光90E16为双亲，以其杂交后代进行游离小孢子培养所得的包括59个单株的DH群体为试材，构建了AFLP遗传连锁图谱。获得的主要结果如下： 1、提取大白菜总基因组DNA以改良CTAB法为宜。本研究所提取DNA主带清楚，无降解现象，浓度在40～60ng/μl之间，样品间浓度均一，分子量在50 kb左右，可与λDNA相比较。预扩增反应结果显示DNA呈均匀的弥散状，片段大小为100～500bp。说明本研究所提取DNA质量较好。 2、利用双亲对E+3／M+3进行引物筛选，共获得多态性较好的引物组合83对，产生多态性条带482条，平均5.8条／引物组合。应用其中的62对引物组合对DH群体进行AFLP标记分析，共获得426个AFLP多态性标记，平均6.9个／引物组合。在426个AFLP标记中，有125个标记来自母本汴早26，110个标记来自光90E16，两者比例接近1：1，其中40个标记表现为共显性遗传。 3、对426个AFLP标记进行x~2检验，在p＜0.05的条件下，有210个标记发生偏分离，偏分离比例为49.3％，其中有127个标记来自母本汴早-26，83个标记来自父本光90E16。 4、运用JoinMap3.0软件对426个标记进行连锁分析，得到一张包括十大主要连锁群的遗传图谱，该图谱包括346个AFLP标记，覆盖基因组长度708cM，平均图距为2.0 cM。连锁群长度集中在39～105 cM之间，连锁群上标记数为9～87个，平均图距为1.2～4.3 cM。连锁群中包含152个偏分离标记，所占比例为35.68％。统计偏分离标记在连锁群中的分布，发现了6个偏分离热点，偏分离标记在热点区域内多以标记簇形式分布。 5、应用软件GGT对DH群体的59个单株进行基因型分析，平均每个单株染色体来自母本的频率为50.09％，来自父本的频率为45.92％，两者比例相近，该DH群体未发生严重的偏分离。