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目的：构建真核表达质粒pYr-adshuttle-1-iNOS，并将它转染至人乳腺癌MCF-7细胞，探讨诱导型一氧化氮合酶(Inducible Nitric Oxide,iNOS)对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法：（1）构建诱导型一氧化氮合酶(Inducible Nitric Oxide,iNOS)的真核表达质粒pYr-adshuttle-1-iNOS；（2）分置三组：空白对照组、pYr-adshuttle-1-iNOS转染组、pYr-adshuttle-1转染组。按试验分组分别将pYr-adshuttle-1-iNOS、pYr-adshuttle-1转染人乳腺癌细胞MCF-7；（3）Western Blot检测各组细胞转染48h后iNOS的蛋白表达情况；（4）检测各组细胞在转染0h、24h、48h后的NO浓度；（5）MTT法检测各组细胞在转染0h、24h、48h、72h后对细胞增殖的影响；（6）流式细胞术检测各转染组细胞转染48h后的细胞周期和细胞凋亡情况。结果：(1)成功构建iNOS基因的真核表达质粒。(2)Western-blot检测结果显示：pYr-adshuttle-1-iNOS转染组iNOS蛋白表达水平较其他两组明显增高（P<0.05），而空白对照组及pYr-adshuttle-1转染组无明显差别（P>0.05）。(3)pYr-adshuttle-1-iNOS转染组细胞在转染24h、48h后的NO浓度较其他两组明显增高（P<0.05），而pYr-adshuttle-1转染组和空白对照之间无差异（P>0.05,）。(4)MTT结果示，pYr-adshuttle-1-iNOS转染组在转染48h、72h后对MCF-7的增殖均有抑制作用（P<0.05），而pYr-adshuttle-1转染组和空白对照之间无差异（P>0.05）。(5)流式细胞术检测显示：空白对照组、 pYr-adshuttle-1-iNOS转染组、pYr-adshuttle-1转染组细胞的凋亡率分别为：4.8%、26.7%、6.8%，说明iNOS的过表达可能会引起MCF-7细胞凋亡率的增加。根据细胞周期数据结果分析，iNOS组的%G1（G1期细胞数占总细胞数的百分比）较空白组和pYr-adshuttle-1组的%G1有所增高，故初步推测，iNOS组的周期有可能在G1/S期有所阻滞。结论：1携带iNOS基因的pYr-adshuttle-1-iNOS，转染乳腺癌细胞MCF-7后能够使iNOS过表达，并能持久产生高浓度的NO。2iNOS的过表达能够对MCF-7细胞的增殖产生抑制作用。3iNOS的过表达可能促进MCF-7细胞凋亡。4iNOS的过表达可能使MCF-7细胞周期在G1/S期有所阻滞。