背景:肿瘤转移和扩散是乳腺癌患者死亡的主要原因,而上皮-间充质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）是肿瘤细胞发生侵袭转移的关键过程。研究发现,铁死亡是以细胞内不受控制的脂质堆积和铁离子增多为特征的死亡方式,为乳腺癌患者的治疗提供了一个新的视野。前期有研究表明法尼醇X受体（farnesoid X receptor,NR1H4/FXR）在EMT和铁死亡过程中起着关键的作用,但FXR如何调控铁死亡进而抑制乳腺癌侵袭转移的机制尚不清楚。目的:本研究通过临床乳腺癌样本、乳腺癌细胞转移模型和裸鼠移植瘤模型,探讨FXR调控的铁死亡对乳腺癌细胞发生EMT和肺转移的影响,为乳腺癌的临床治疗提供新的策略与科学依据。方法:1.通过免疫组织化学实验（immunohistochemical,IHC）检测临床乳腺癌样本中FXR与EMT相关标志物Vimentin的表达,分析两者与临床病理特征之间的关系以及FXR和Vimentin的相关性。2.采用TGF-β1建立乳腺癌细胞EMT模型,通过小分子抑制剂Z-Guggulsterone（Z-GS）和si RNA技术抑制FXR的表达,CCK8检测Z-GS对正常乳腺上皮细胞MCF-10A和乳腺癌细胞MDA-MB-231、MCF-7增殖的影响。细胞划痕、Transwell迁移和侵袭实验考察FXR对乳腺癌细胞侵袭转移的影响。Western blotting检测EMT相关蛋白和铁死亡相关蛋白含量的变化及测定细胞内ROS、lipid ROS、MDA以及Fe2+的水平。3.采用裸鼠移植瘤模型考察FXR对移植瘤生长和肺转移的影响,检测肿瘤中MDA、Fe2+、GSH的变化情况。HE染色观察裸鼠肿瘤、肺、肝、肾的病理学变化以及IHC观测FXR、EMT相关指标E-Cadherin和铁死亡相关指标GPX4的表达情况。结果:1.临床样本结果发现,发生转移的乳腺癌患者,其癌组织中FXR和Vimentin的表达比癌旁组织高。而且,与没有发生转移的乳腺癌患者的癌组织相比,发生乳腺癌转移患者的癌组织中FXR和Vimentin的表达更高。此外,我们还发现,FXR的表达与Vimentin的表达呈正相关。2.在乳腺癌细胞中,结果发现20μM和40μM FXR拮抗剂Z-GS能够明显减少乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7增殖。在细胞划痕、Transwell迁移、侵袭实验中,相比20μM Z-GS,40μM Z-GS更加显著地抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7的侵袭转移。通过加入铁死亡抑制剂Ferrostatin-1（Fer-1）、坏死抑制剂Necrosulfonamide（NSA）、凋亡抑制剂Z-VAD-FMK以及自噬抑制剂3-methyladenine（3-MA）发现Z-GS主要通过诱导铁死亡发挥抗肿瘤增殖的作用。Western blotting结果显示,FXR拮抗剂Z-GS及si FXR能够显著抑制FXR的表达与EMT相关蛋白N-Cadherin和Vimentin及上调E-Cadherin的表达,并显著下调负性调节铁死亡相关蛋白SLC7A11、FTH1和GPX4的表达。与TGF-β1组相比,TGF-β1+Z-GS处理组的ROS、lipid ROS、MDA以及Fe2+的水平显著升高。铁死亡诱导剂erastin能够增强FXR拮抗剂Z-GS的作用,进一步抑制乳腺癌细胞的侵袭转移,而Fer-1则相反。3.在裸鼠移植瘤实验中,结果发现FXR拮抗剂Z-GS能够显著抑制移植瘤的生长和肺转移,而且铁死亡诱导剂erastin能够增强Z-GS的作用,进一步抑制肿瘤的生长和肺转移,铁死亡抑制剂Fer-1则相反。有趣的是,我们也发现FXR拮抗剂Z-GS能够显著上调移植瘤组织中的MDA和Fe2+水平,下调GSH水平。与此同时,western blotting和IHC结果也显示Z-GS能够显著上调E-Cadherin的表达,下调FXR和GPX4的表达。此外,肝肾组织HE染色的结果显示Z-GS对裸鼠的肝肾均无毒副作用。结论:1.FXR和Vimentin在临床乳腺癌组织中表达高于乳腺癌癌旁组织,且FXR和Vimentin的高表达与乳腺癌患者的淋巴结转移、TNM分期晚有关。2.FXR拮抗剂Z-GS和si FXR可能通过诱导铁死亡进而逆转乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7的侵袭转移和EMT。3.FXR拮抗剂Z-GS通过诱导铁死亡从而抑制裸鼠移植瘤的生长和肺转移。