R-工程菌表达产物的分离与纯化研究

来源 :山东农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gelsy1982
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该论文的研究的主要内容包括R-工程菌发酵条件研究、酯酶B1的分离纯化和酯酶B1的酶学性质研究.研究表明,接种量5﹪时,R-工程菌在pH6.7的LB液体抗性培养基上37、200rpm震荡培养10小时能获得最佳菌体生长量和酯酶产量.酯酶B1的产生与菌体生长呈完全相关性.发酵液经3500rpm,20min离心收集菌体,用石英砂冰浴研磨20分钟,抽提酯酶.粗酶液经硫酸铵分组盐析、SephadexG-50分子筛柱层析脱盐、DEAE-SepharoseFastFlow离子交换层析、SephadexG-75分子筛柱层析得到凝胶电泳基本均一的酯酶.该酶的最佳作用条件是37℃、pH7.0.该酯酶可用于开发生产新型去除农药残留的清洗剂,以清除瓜果、蔬菜等表面的农药残留具有很好的效果.其固化酶可用于开发净化农药污染污水的生物反应器.
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