新疆桑枝的质量标准及降血糖活性的研究

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目的:以中国药典(2015版)质量标准为指导原则,运用多种方法和技术,建立桑枝的显微鉴别和多指标成分的薄层鉴别及多指标成分的含量测定,完成常规项目的检查。在此基础上,撰写新疆桑枝质量标准提高的草案。此外,运用动物体内活性实验,进行桑枝中水溶性生物碱(MASA)降血糖活性的研究。方法:1.运用荧光倒置显微镜对桑枝粉末进行鉴别。2.采用TLC和ME-TLC对桑枝中的桑皮苷A、芦丁、东莨菪苷、绿原酸、东莨菪素、桑辛素、白藜芦醇、槲皮苷、1-脱氧野尻霉素(DNJ)、γ-氨基丁酸(GABA)等指标成分进行鉴别。3.对十批次桑枝中的水分、总灰分、酸不溶性灰分、醇溶性浸出物等常规项目进行检查。4.运用HPLC-UV对桑枝中桑皮苷A、绿原酸、东茛菪素、白藜芦醇、桑辛素、DNJ及GABA等化学成分进行含量测定。5.分离萃取MASA,对四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠灌胃给药,测量小鼠体重、血糖值、脏器指数及肝、肌糖原等指标。结果:1.桑枝粉末中有含晶厚壁细胞、草酸钙方晶、石细胞、木栓细胞、木射线细胞、木纤维及不同类型的导管等特征结构。2.薄层色谱对不同指标成分鉴别的最佳条件:硅胶G板上,以正丁醇-冰乙酸-水(90:24:24)为展开剂,氯-联甲苯胺为显色剂,白光下检视,可以将桑枝中DNJ进行较好分离鉴定;硅胶G板上,以正丁醇-冰乙酸-水(8:4.4:2)为展开剂,0.2%茚三酮溶液为显色剂,105℃下加热至颜色出现,白光下检视,可以将桑枝中GABA进行较好分离鉴定;硅胶G板上,以氯仿-乙酸乙酯-甲酸(44:30:27)为展开系统,5%AlC13乙醇溶液为显色剂,105℃下加热5min,366nm下检视,可分离鉴别出桑枝中桑皮苷A、芦丁、东莨菪苷、绿原酸、东茛菪素、桑辛素等6种指标成分;聚酰胺薄膜上,以含水量75%的SDS-正丁醇-正庚烷(27:63:10)微乳液-甲酸(9:1)为展开剂,1%AlC13乙醇溶液为显色剂,366nm下检视,可分离鉴别出桑枝中白藜芦醇、桑辛素、槲皮苷、东莨菪素、绿原酸、芦丁、桑皮苷A、东茛菪苷等8种指标成分。3.十批次桑枝水分含量在5.70%~8.02%,总灰分在2.60%~4.72%,酸不溶性灰分在0.47%~1.47%,醇溶性浸出物在1.65%~2.71%之间。4.十批次桑枝中桑皮苷A不低于1.33 mg/g,绿原酸不低于0.39 mg/g,东茛菪素不低于0.37 mg/g,白藜芦醇不低于0.05 mg/g,桑辛素不低于0.22 mg/g,DNJ不低于50 μg/g,GABA不低于11.0 μg/g。5.桑枝中水溶性生物碱可以缓解糖尿病小鼠体重减少的症状,改善组织脏器的增生、充血及萎缩等病变,降低血糖值,促进肝糖元和肌糖元合成的作用。结论:1.本研究是以中国药典质量标准为指导原则,建立了新疆桑枝的显微鉴别特征和多指标成分的薄层鉴别、常规检查、多指标成分的含量测定方法,并在此基础上撰写了新疆桑枝质量标准提高的草案。2.初步确定桑枝中水溶性生物碱具有降血糖作用。
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