富硒、铬益生菌的制备及其对高脂饮食ICR小鼠脂代谢的影响

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硒和铬是人和动物所必需的微量元素。在人和动物体内硒通过与蛋白质相结合形成多种硒蛋白,并以此为基础发挥广泛的生物学功能如:抗氧化、增强机体的免疫力、提高机体的繁殖力、拮抗有毒元素、防止地方性流行病等。铬通过共价键与相关的氨基酸结合,形成葡萄糖耐量因子,调节葡萄糖在体内的代谢,并以此为基础进而调节机体脂、蛋白质和核酸代谢。目前在人类营养和动物生产中所用的必需微量元素添加剂一般为无机形式的盐,如硒的无机形式添加剂主要为亚硒酸钠,而无机形式的铬添加剂主要为三氯化铬。因无机形式的必需微量元素一般都存在吸收利用率低、毒性大并会对环境造成潜在的污染等弊端,目前许多国家已尝试使用有机形式的必需微量元素添加剂。益生菌是一类进入机体后能对宿主发挥多种生物学益处的有益微生物,如酵母菌中的某些种,以及多数乳酸菌。益生菌具有生长周期短、生长繁殖快并能适应高浓度的金属元素的优点,因此益生菌常被用来作为无机必需微量元素转化为有机必需微量元素的理想载体。在此基础上,既可以保持益生菌的生物学功能,也能发挥必需微量元素的生物学功能。本试验通过体外实验研究了四株具有有机硒转化活性的益生菌的降脂性能;以这四株益生菌为有机硒、铬的转化载体,探索了富硒、铬益生菌的培养条件,得出在本实验室条件下最优的富硒、铬益生菌制备条件;以及富硒、铬益生菌对高脂饮食ICR小鼠脂代谢的调节作用,为富硒、铬益生菌在降血脂方面的应用提供理论基础。试验1采用体外实验方法研究了具有有机硒转化活性的4株益生菌对肠道不良环境的抵抗力、耐脂和降脂能力及在高脂状态下恢复肠道常在菌群的能力。结果表明:四株益生菌均能适应pH为3.0和胆盐含量为0.3%的环境;高浓度的胆固醇(CHO)(>0.6%)和甘油三酯(TG)(>9.0%)能显著影响四株益生菌的生长(P<0.05);四株益生菌均能降解CHO和TG,两者被降解的量分别为6.77-25.78μg·mL-1和3.80-10.25μg·mL-1不等;在体外高脂条件下,四株益生菌均能恢复肠道常在菌群。四株益生菌中,La降解的CHO和TG的量分别均超过10μg·mL-1L和20μg·mL-1,是良好的耐脂和降脂备选菌株。试验2本试验通过单因子试验和正交试验对富铬益生菌的培养条件进行了探索和优化。研究了起始pH、培养时间、培养温度、接种量和铬浓度对四种益生菌生长状况的影响。通过优化实验确定了富铬益生菌的最优培养条件:起始pH为6.0,培养时间为36h,培养温度为34℃,接种量为8%,铬浓度为20μg·mL-1。在此条件下培养,四种益生菌的数量均能达到108-109cfu·mL-1,有机铬转化率为89.32%,有机铬含量达17.86μg·mL-1。试验3在试验二的基础上,研究了培养基中同时存硒和铬对混合培养的四株益生菌生长状况的影响。选择四个硒水平(2.5、5、7.5和10μg·mL-1)与四个铬水平(5、10、15和20μg·mL-1),以完全对法讨论培养基中不同硒、铬浓度对混合培养的四株益生菌生长状况的影响,以及对有机硒、铬转化率和有机硒、铬总量的影响。实验结果表明,当培养基中硒、铬的浓度分别为7.5μg·mL-1和10μg·mL-1时,有机硒、铬的转化率均能达到70%,有机硒、铬的含量可分别达到5.53μg·mL-1和7.02μg·mL-1,四种益生菌的数量能达到108cfu·mL-1。试验4本实验研究了富硒、铬益生菌对高脂饮食ICR小鼠脂代谢的影响。40只雄性ICR小鼠随机分为4组:NC组(正常对照对),HFD组(高脂对照组),ISC组(益生菌+无机硒、铬组)和OSC组(富硒、铬益生菌组)。NC组给予常规饲料,其余组给予高脂饲料;NC和HFD组灌胃无菌双蒸水,ISC和OSC组灌胃由无菌双蒸水配置的相应受试物。观察实验动物的一般情况和血清中血糖、血脂以及肝脏和粪便中脂质的变化。10周后,HFD组血糖、血脂以及肝脏中脂质的量均显著高于NC组,而ISC和OSC组均显著低于HFD组;ISC和OSC组粪便中的脂质也显著高于HFD组.ISC和OSC组间血糖、血脂和粪便中脂质的量不存在显著差异,但OSC组肝脏中脂质的量显著低于ISC组。结果表明,益生菌和无机硒、铬混合物与富硒、铬益生菌均能降低高脂饮食ICR小鼠血糖、血脂、肝脏脂质并增加随粪便排出的脂质的量,但富硒、铬益生菌的上述功效优于益生菌和无机硒、铬混合物.
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