【摘 要】
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水痘和带状疱疹是由水痘-带状疱疹病毒(Varicella-Zoster Virus,VZV)引起的轻症状疾病,但延误其诊断和治疗通常会导致严重的并发症,甚至死亡。然而,大多数商业化的VZV诊断性检测方法的灵敏度较低,而高特异性的商业化诊断检测方法未在全球范围内广泛应用。在本研究中,我们研发并检验了一种高灵敏度的VZV诊断试剂盒。该诊断方法基于化学发光免疫分析(CLIA),以VZV糖蛋白E(VZV-
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水痘和带状疱疹是由水痘-带状疱疹病毒(Varicella-Zoster Virus,VZV)引起的轻症状疾病,但延误其诊断和治疗通常会导致严重的并发症,甚至死亡。然而,大多数商业化的VZV诊断性检测方法的灵敏度较低,而高特异性的商业化诊断检测方法未在全球范围内广泛应用。在本研究中,我们研发并检验了一种高灵敏度的VZV诊断试剂盒。该诊断方法基于化学发光免疫分析(CLIA),以VZV糖蛋白E(VZV-gE)作抗原检测VZV特异性IgA、IgG和IgM。另外,目前VZV感染的疗法有诸多弊端,如只能缓解症状而不能中和毒粒,不适用于孕妇和哺乳期女性等VZV易感人群。我们从羊驼中制备了对VZV-gE具有高亲和力的纳米抗体,并证明了将其用于VZV感染的强效免疫治疗的可能性。作为一种免疫治疗方法,纳米抗体有可能完全中和更深层组织(如神经元细胞)中停留在潜伏期的病毒,因而相较传统疗法有很大优势。我们的诊断试剂盒检测VZV-gE特异性IgG、IgA和IgM的诊断灵敏度分别为95.24%、95.24%和97.62%,特异性分别为100%、98.01%和98.90%。当组合检测VZV-gE特异性IgG、IgA和IgM时,该方法具有最佳性能,灵敏度、特异性和总体一致性分别达到97.62%、100%和99.80%。用我们的诊断试剂盒进行组合检测能高效检测出患者样本中非常低滴度的免疫球蛋白,而目前包括ELISA在内的诊断检测方法很难将这些患者诊断为阳性。在包含高差异性的VZV特异免疫球蛋白滴度个体的一个随机人群中,该方法分别检测IgA、IgM和IgG的诊断灵敏度分别为 74.19%、93.55%和 69.35%,特异性分别为 96.03%、98.01%和 99.78%;而组合检测IgG、IgA和IgM的诊断敏感度、特异性和总体一致性分别为98.39%、100%和99.81%。因此,对于常规VZV诊断和未接种疫苗个体的VZV感染评估,我们的诊断试剂盒在灵敏度和特异性方面都能更胜一筹。此外,我们证明了由羊驼产生的纳米抗体与VZV-gE可以形成治疗性免疫复合物,这说明在减轻VZV感染、阻碍病毒再激活等相关方面,使用这些纳米抗体尤其是NbG14和NbG8可能是一种极具研究价值的免疫疗法。
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