【摘 要】
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目的:探究孤独症模型鼠海马区BDNF-Trk B通路表达及神经元数量在不同时间点的改变情况,探讨二者的改变之间是否存在联系,从而为孤独症谱系障碍发病机制的研究提供思路。方法:随机选取24只孕鼠于E12.5腹腔注射VPA(600 mg/kg,VPA按250 g/L溶于生理盐水中),孕鼠产下的仔鼠为孤独症模型鼠(模型组)。随机选取12只孕鼠于E12.5腹腔注射同等剂量生理盐水,孕鼠产下的仔鼠为对照组。
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目的:探究孤独症模型鼠海马区BDNF-Trk B通路表达及神经元数量在不同时间点的改变情况,探讨二者的改变之间是否存在联系,从而为孤独症谱系障碍发病机制的研究提供思路。方法:随机选取24只孕鼠于E12.5腹腔注射VPA(600 mg/kg,VPA按250 g/L溶于生理盐水中),孕鼠产下的仔鼠为孤独症模型鼠(模型组)。随机选取12只孕鼠于E12.5腹腔注射同等剂量生理盐水,孕鼠产下的仔鼠为对照组。分别对两组仔鼠进行发育及行为学检测。应用免疫荧光及图像分析技术,检测P7、P21、P28、P35、P42时,两组仔鼠海马区神经元细胞数量的变化。应用蛋白质免疫印迹及图像分析技术,检测P7、P21、P28、P35、P42时,两组仔鼠海马区BDNF和Trk B蛋白表达的变化。应用荧光定量PCR技术,检测P7、P21、P28、P35、P42时,两组仔鼠海马区BDNF和Trk B的m RNA表达的变化。采用SPSS26.0对数据进行统计学分析。结果:本研究发现,与对照组仔鼠相比,模型组仔鼠存在以下异常:(1)发育及行为学方面:体重降低,脑重早期过度增长后期增长缓慢,睁眼时间延迟,方向趋向性能力降低,重复性刻板行为增加,学习记忆能力下降。以上差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)免疫荧光检测:在P7、P21、P28时,模型组仔鼠神经元数量多于对照组(P<0.05),在P35、P42时,模型组仔鼠神经元数量少于对照组(P<0.05)。(3)蛋白质免疫印迹检测:在P7、P21、P28时,模型组仔鼠海马区BDNF和Trk B蛋白表达都高于对照组(P<0.05),而在P35、P42时,VPA组仔鼠海马区BDNF和Trk B蛋白表达低于对照组(P<0.05)。(4)荧光定量PCR检测:在P7、P21、P28时,模型组仔鼠海马区BDNF和Trk B的m RNA表达都高于对照组(P<0.05),而在P35、P42时,VPA组仔鼠海马区BDNF和Trk B的m RNA表达低于对照组(P<0.05)。结论:孤独症模型鼠海马区BDNF-Trk B通路早期过度表达,后期表达下降。孤独症模型鼠海马区神经元数量早期过度增殖,后期增长缓慢。孤独症模型鼠海马区BDNF-Trk B通路表达改变与神经元数量增长的变化趋势一致。
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