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目的：建立并验证急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）微小残留病的三色流式细胞术检测方法。 方法：应用抗体组合CD10/CD20/CD19，CD10/TdT/CD19，CD34/CD38/CD19，CD34/CD22/CD19，CD34/CD45/CD19作为检测白血病微小残留病的探针，得出正常骨髓与B-ALL骨髓CD19+细胞流式细胞术散点图特征，据此建立B-ALL微小残留病三色流式细胞术检测方法，用已知样品稀释实验验证灵敏度；对13份B-ALL初诊骨髓样品和22份缓解期骨髓样品进行检测，同时以多聚酶链反应（PCR）检测IgH-CDRⅢ和TCRγ重排基因来评价该三色流式细胞术的检测效果。 结果：1．CD19+细胞5种抗体组合流式散点图特征：①正常人骨髓细胞在不同抗体组合流式散点图上特征各异，但不同个体在同一抗体组合的散点图上特征大致相似；②显示正常CD19+细胞的成熟过程及各阶段细胞比例；③B-ALL骨髓正常散点图特征被破坏，获完全缓解后正常骨髓特征性散点图可重现。2．残留白血病细胞出现在正常骨髓特征性散点图分布区之外，与初诊时白血病细胞出现的位置相同。3．13份B-ALL初诊骨髓标本中，12份（92.3％）至少有一组抗原组合表达异常，最常见的异常抗原组合是CD10/CD20/CD19（61.5％）。4．检测系统条件优化后，对范围在1：1～1：10000频率的白血病细胞的检出值与实际值有较好的相关性（r=0.83，P=0.00）。5．22份B-ALL缓解期骨髓标本6份流式检测阳性；9份标本PCR检测阳性。流式检测阳性的6份标本同时PCR检测阳性。 结论：上述5种抗体组合流式散点图特征准确地描述了正常人骨髓CD19+细胞发育过程中的不同阶段及各阶段细胞在相应抗体组合散点图中的相对位置规律，这构成本研究B-ALL微小残留病检测的基础，我们据此成功地建立了B-ALL微小残留病检测的方法，其灵敏度在1×10-4水平。